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血液分析仪与手工计数法在血小板检测中的效果评价

2012-07-21张雅婧武青青

延安大学学报(医学科学版) 2012年3期
关键词:计数法分析仪计数

张 梅,张雅婧,武青青

(延安大学附属医院 检验科,陕西 延安 716000)

目前,大多数医院都采用血液分析仪来测定血小板。这些仪器因为操作简单、测定快捷已成为临床实验室最常用的分析仪器之一。血液分析仪的普及,很大程度上减轻了工作人员的劳动强度,提高了工作效率和实验结果的准确性。但即便是最先进的分析仪器,当其出现血小板计数值偏高或偏低以及其他报警信号时,仍需检验人员加以准确判断、综合分析后发放报告单。血小板由于体积小,特别容易发生粘附、聚集和变性破坏,所以在计数时最易受干扰,经常难以准确计数。为了全面了解和研究血液分析仪与手工计数血小板的一致性,本文就延安大学附属医院检验科使用的ADVIA2120、XS-800i五分类血液分析仪进行对比,以便及时、准确的为临床作出辅助参考。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

SysmexXS-800i五分类血液分析仪(日本sysmex公司),SiemensADVIA2120五分类血液分析仪(德国西门子公司),MDI-9702多功能超高倍显微仪和改良牛鲍血细胞计数板。仪器所用试剂均为相应公司提供的配套试剂,手工法所用试剂为WHO推荐的草酸铵稀释液,该稀释液按《全国临床检验操作规程》第3版要求严格配制。

1.2 标本采集

2010-10~2011-01门诊及住院患者128例,采用抗凝真空管,严格按照要求(抗凝剂与血液比例严格控制)采集肘静脉全血2 ml,血流通畅,无凝块和溶血。

1.3 方法

1.3.1 质量控制 两台血液分析仪每天用配套的全血质控品作室内质控,各参数检测值均在规定的限值范围内;牛鲍计数板经过校正。

1.3.2 检测方法 128例标本分别用ADVIA2120、XS-800i两台仪器和手工计数法检测血小板数并记录。全部测定在2 h内测定完毕。注意在仪器测定时将标本混匀。手工计数法是配制好的10 g/L草酸铵稀释液吸取0.38 ml置于洁净无污染的小试管中,另取标本20 ul加入稀释液中,并将二者充分混匀。静置30 min后取混匀的血小板悬液1滴充入计数池内,再静置10 min,使血小板充分下沉。在高倍镜下计数中央大方格的四角和中央共5个中方格内的血小板数量。由一名经验丰富的主管检验师手工计数血小板2次,取平均值。

1.4 统计学处理

用Spass13.0软件包进行数据的处理。结果之间的比较采用变异系数和相关性分析。

2 结果

2.1 仪器法与手工计数法检测血小板的平均水平及变异系数(%)的比较

XS-800i、ADVIA2120和手工计数法的变异系数分别为1.07%、1.11%、1.02%。可以看出:XS-800i的变异系数与ADVIA2120的相比,前者与手工计数法的变异系数接近,说明二者的同质性较好。同时,XS-800i的靠近手工计数法的,说明在检测血小板时,XS-800i的准确性高于ADVIA2120,更接近手工计数。用ADVIA2120检测血小板时,检测出的数值会比实际的数值高。

表1 仪器法与手工计数法检测血小板的平均水平及变异系数(%)的比较

2.2 两台血液分析仪与手工计数法的相关性分析

XS-800i与手工计数法的相关性实验结果见图1,相关系数 r=0.963,P<0.001,两者的回归方程为y=14.274+0.911x(x为 XS-800i,y为手工计数法。从相关系数看,XS-800i与手工计数法有较好的相关性。

图1 XS-800i与手工计数法的相关性分析

图2 ADVIA2120与手工计数法的相关性分析

ADVIA2120与手工计数法的相关性实验结果见图2,相关系数 r=0.953,P<0.001,两者的回归方程为 y=21.868+0.758x(x为 ADVIA2120,y为手工计数法)。从回归系数可以看出:ADVIA2120与手工法检测血小板比XS-800i与手工法检测血小板差异要大。

3 讨论

XS-800i为全自动血液分析仪,是sysmex最新研发的紧凑型五分类血液分析仪,它采用半导体激光流式细胞术、核酸染色技术和流体力学聚焦原理对血液细胞进行分析。无论静脉血模式还是末梢血模式都只需要20ul微量血,从而满足儿童、肿瘤化疗病人等采血困难病人的特殊采血要求。XS-800i是采用鞘流电阻原理来计数血小板的。当血液中存在大PLT或细胞碎片时,仪器利用散射光和侧向荧光参数进行PLT计数。同时仪器配备的鞘流机制使PLT计数有着优越的准确性和重复性[1]。在临床上,当疾病导致血小板破坏增多,血小板减少到一定程度时,就可能引起血小板形态及功能发生反应性变化,如出现不同比例的大血小板,而这些大血小板可被误认为是红、白细胞而不被血液分析仪所识别,从而造成血小板计数假性降低[2]。另外,当测定静脉血标本时,操作者的混匀时间、方式和力度的差异,也在一定程度上影响PLT的检测结果。实验结果显示:XS-800i无论是变异系数还是与手工计数的相关性分析,都说明XS-800i检测血小板结果比较准确,与手工检测的结果接近。

ADVIA2120全自动血液分析仪是德国西门子生产推出的。每小时可测120份标本,可以满足临床不同标本检测的需求并节约试剂成本。ADVIA2120有手动和自动两种模式,应用专用的WBC/BASO和WBCDIFF检测通道,采用二维光散射分析法对PLT进行检测。一维决定体积(低角度散射),一维决定密度(高角度散射),能准确区分小红细胞、红细胞鬼影、大血小板、红细胞碎片和杂质等,可测量体积大至60 fl的血小板[3]。从实验结果分析显示:相比XS-800i而言,ADVIA2120与手工计数PLT的一致性较差。对于ADVIA2120来说,RBC和PLT的检测在同一通道,所以会有一些红细胞碎片以及其他大小类似于血小板的污染颗粒会被误认为血小板而计数在内,进而造成计数结果偏高;而一些体积过小的血小板无法被机器识别造成漏检[4]。所以,在与手工计数法作相关性分析时,相关系数r=0.953,同时由回归方程可以得到,ADVIA2120与手工计数法的相关性不如XS-800i理想,所测的结果比实际的血小板数值高。在仪器计数结果出现偏差的时候,均应进行手工复检,尽可能的为临床提供一个反应病人真实情况的检测结果,以确保临床正确的诊疗方向。

综上所述,虽然XS-800i和ADVIA2120两台仪器的主要性能都很好,但在血小板计数方面,XS-800i较ADVIA2120与手工计数法有着较好的一致性,计数结果较为准确。然而在自动化分析仪飞速发展的今天,尽管它快速简便、精密度高、重复性好,但这仅是种过筛手段,并不能完全取代手工法[5]。当PLT计数结果出现异常时,还需进行手工复检,从而得出准确的检验结果。

[1]焦瑞宝,唐吉斌,曹春鸾.两种血细胞分析仪与镜检法血小板计数的比较[J].检验医学与临床,2009;18(6):1526-1527.

[2]巩惠芸,顾晓菁.相差显微镜血小板计数法对血细胞分析仪测定“血小板计数减少”结果的复核作用[J].检验医学,2004;19(6):524-527.

[3]陈梅,黄丽云,方伟祯等.XE-2100全自动血细胞分析仪两种血细胞计数方法与镜检法计数血小板的比较[J].临床和实验医学杂志,2008,7(3):99-100.

[4]杜明,夏和凤,纪桂香.五分类血细胞分析仪与手工镜检测定结果比较[J].中国误诊学杂志.2008,12(8):2853-2854.

[5]秦海秋,郭辉.分析仪法测定血小板的影响因素分析[J].检验医学,2007;22(8):123-124.

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