吕敏娜，戚南山，覃宗华，廖申权，余劲术，袁建丰，吴彩艳，孙铭飞＊

（1.广东省农业科学院兽医研究所，广东 广州 510640；2.广州英赛特生物技术有限公司，广东 广州 510663）

鸭病毒性肝炎（Duck viral hepatitis，DVH）是由鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV）引起雏鸭的一种高度致死性、传播迅速的病毒性传染病[1]。我国于1963年在上海首次报道了该病的临床病例，1980年在北京某鸭场分离到该病毒[2]，郭玉璞等于1984年将该病毒确定了DHV－1[3]。鸭病毒性肝炎临床表现痉挛、抽搐和角弓反张等神经症状，以发病急、传播快、病死率高为主要特征，病理变化以肝脏肿胀和出血为特征性病变[4－5]。Ⅰ型鸭病毒性肝炎呈世界性流行，也是我国主要流行的血清型，此病不仅严重影响养鸭业的发展，而且造成的经济损失也相当严重。

DHV编码含2249个氨基酸的一个多聚蛋白[6]，经过一系列蛋白裂解，产生3种结构蛋白（VP0、VP3、VP1）和8个非结构蛋白（2A1、2A2、2B、2C、3A、3B、3C、3D）[7－9]。其中，VP1含有多个抗原表位，不仅能诱导机体产生免疫反应，还能诱导感染动物产生中和抗体，VP1包含了大多数与细胞受体相互作用和中和表位[10－13]。因此，VP1 与DHV的致病性关系密切，作为研制新型疫苗的候选分子而成为近年来的研究热点。

本研究将扩增的DHV－I VP1基因定向克隆到原核表达载体pMAL－C2X中，得到重组表达质粒pMAL－C2X－VP1，利用IPTG 诱导在 E.coli BL21（DE3）进行融合表达，为DHV－I VP1蛋白的结构与功能等后续相关研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试验材料 Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV－I）GD株为广东省农科院兽医研究所分离、保存；E.coli DH5a、BL21（DE3）购自 Novagen公司；pGEMT easy、RNA提取试剂盒、RT－PCR试剂盒购自Promega公司；DNA胶回收试剂盒购自Omega公司；……