陈仕龙，陈少莺＊，王 劭，李兆龙，程晓霞，林锋强，朱小丽，江 斌，黄梅清，郑 敏，毛 宁

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建 福州 350013；2.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福建 福州 350013）

2010年9月，福建省长乐某蛋鸭养殖场出现一种产蛋鸭发热、产蛋显著下降、采食减少、后备小鸭头颈歪斜、软脚为主要特征的疾病。剖检主要表现为脑壳出血、卵泡出血、萎缩，部分卵黄破裂，形成卵黄性腹膜炎。为明确病因，福建省农业科学院畜牧兽医研究所动物病毒研究室（以下称本实验室）在该场发病鸭病料中分离到一株病毒，经分离毒的部分理化特性分析、动物回归、RT－PCR等测定，证实分离毒是导致该场疾病的病原，属于黄病毒科黄病毒属的鸭黄病毒。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集及处理 病料来源于2010年福建省长乐某蛋鸭养殖场。无菌采集减蛋蛋鸭的肝、脾、胰腺、卵泡、输卵管、卵巢等组织，经接种鲜血琼脂平板后，剪碎研磨，以Hank＇s液制成1∶5匀浆，加双抗各1000单位，4℃过夜，冻融3次，6000r／min离心20min，取上清液为病毒分离的病料。

1.1.2 病毒、血清及禽胚 鸡黄病毒分离株CJD05由本实验室分离、鉴定、保存。鸡抗鸡黄病毒阳性血清，由本实验室制备保存。11日龄番鸭胚购自福州山区健康番鸭场；SPF鸡胚购自福州大北农生物技术有限公司，并孵化至9日龄。

1.2 方法

1.2.1 病毒分离 取病料处理物经尿囊腔接种11日龄番鸭胚和9日龄SPF鸡胚各4枚，0.1mL／枚，37℃孵育，每日观察2次至第7天，弃去24h内的死胚，死亡胚胎置4℃冰箱4h以上，剖检、观察病变，收获胚胎和胚液，在－70℃冻存或传代。……