杨雪蓉 姚 政 陶 枫 徐佩英 顾逸梦 徐隽斐 沈远东 陆 灏△

（1.上海中医药大学附属曙光医院，上海 201203；2.上海中医药大学，上海 201203）

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见的并发症之一，其发病率约占糖尿患者的35%～40%，患者一旦出现微量蛋白尿，其肾功能将不可逆转地进行性下降，直至出现终末期肾功能衰竭。本实验通过观察中药复方DM120方对高脂饲料联合链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白表达的影响及形态结构的改变，探讨其对糖尿病肾脏病变的保护作用和机制。

1 材料与方法

1.1 动物 健康雄性Wistar大鼠40只，体质量80～120 g，清洁级，由中国科学院上海实验动物中心提供。饲养于上海中医药大学动物实验中心。自由饮水，不限制活动，每日光照时间12 h，环境温度控制在18～28℃之间。

1.2 药物与试剂 DM120方（黄芪、葛根、生地黄、丹参），药物购自上海中医药大学附属曙光医院，上药用蒸馏水浸没约120min，然后再加数倍蒸馏水，持续煮沸约30 min。取过滤液，再次加适量蒸馏水煮沸，持续约30 min，合并两次滤液并浓缩至2000 mL。分次将滤液离心，2500 r/min，30 min，合并上清液，再次煮沸30 min，将煎剂浓度调整至每毫升浓缩液含生药3 g，4℃冰箱保存。STZ美国Sigma公司生产。高脂饲料由中国科学院上海实验动物中心提供，配方为100 kg中含73 kg基础饲料，20 kg猪油，4 kg白糖，2 kg全脂奶粉，1 kg胆固醇；脂肪约占总能量比的36%。24 h尿微量白蛋白（U-Alb），试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。兔抗大鼠TGF-β1多克隆抗体，由武汉博士德生物工程有限公司提供。

1.3 仪器 罗氏Advantage快速血糖仪；ASP300自动脱水机、G1160石蜡包埋机、RM2235切片机、HI1220烤片机，德国LEICA公司；……