李雅彬 任万强 梁君昭 窦建卫

（1.陕西中医学院，陕西 咸阳 712046；2.湖北省襄阳市中医医院，湖北 襄阳 441000；3.陕西省西安市中医医院，陕西 西安 710001；4.西安交通大学，陕西 西安 710061）

缓慢性心律失常是临床常见的心律失常类型，中医认为多由心肾阳虚、血瘀脉阻引起，临床上常见症状为胸闷、心悸、倦怠乏力、形寒肢冷等，属于中医学“心悸”、“胸痹”、“怔忡”等范畴。笔者在前期扩大样本数的临床观察中已经证实扶正助脉方具有扶正通络、祛瘀化浊的疗效，对缓慢性心律失常患者有良好作用。本研究通过对阳虚瘀阻证缓慢性心律失常大鼠实验模型的药效学研究，分析扶正助脉方对一氧化氮（NO）、Na+-K+-ATP酶的影响，初步探讨扶正助脉方治疗缓慢性心律失常的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物 选用 SPF级 SD大鼠，雄性，体质量（250±20）g，购自西安交通大学医学院实验动物中心，许可证号：SCXK（陕）2007-001号。实验前动物经测试确认无异常行为。

1.2 药物与试剂 （1）扶正助脉方煎剂：西安市中医医院院内煎剂，500 mL/瓶，由桂枝、党参、淫羊藿、苏木、地龙、清半夏、薤白、连翘、鸡血藤等 12味中药组成；（2）心宝丸（60 mg/丸）：广东省药物研究所制药厂，国药准字Z44021843，产品批号20100337；（3）盐酸可乐定：常州制药厂生产，用时用0.9%氯化钠注射液配成所需浓度；（4）氢化可的松注射液（25 mg/5 mL），扬州制药有限公司生产；（5）NO、Na+-K+-ATP试剂盒：南京建成生物工程研究所提供。

1.3 实验仪器 （1）FA1104 N型0.1 mg电子天平：上海天平仪器厂；（2）心电图仪：上海光电医学仪器公司。

1.4 模型制备 大鼠予普食饲料喂养，自由饮水，适应7 d后，每日臀部皮下注射氢化可的松注射液，25 mg/kg，连续14 d。并在实验第2周时，强迫大鼠每日上、下午各游泳1次，至无力即将下沉时捞出，以诱导劳倦过度，持续1周［1］。观察大鼠一般形态，凡出现活动减少，精神不振，反应迟钝，弓背蜷缩、饮水量减少，体质量减轻等肾阳气虚症状者为造模成功［2］。

1.5 分组与给药 选择造模成功的大鼠60只，随机分为高、中、低剂量组，模型对照组、心宝丸组，每组12只，再选取12只健康大鼠为空白对照组。造模成功后次日开始药物干预。空白对照组和模型对照组常规喂养，按大鼠以20 mL/kg体质量灌胃蒸馏水；心宝丸组灌胃心宝丸溶液，质量浓度为20 mL/kg；高、中、低剂量组灌胃扶正助脉合剂，药物质量浓度分别相当于临床剂量12、6、3倍。每组均于每日上午10时灌胃给药1次，连续治疗14 d。

1.7 标本采集与检测 （1）心率：末次给药后1 h用乙醚浅麻醉大鼠，在其四肢皮下埋置电极，记录大鼠清醒后标准Ⅱ导联心电图。第15日以盐酸可乐定2 mg/kg皮下注射，并同时灌胃相应药物，记录灌胃后1 h心电信号，统计分析大鼠心率变化情况［3］。 （2）血液指标：测完大鼠心率后，腹腔注射 10%水合氯醛（350 mg/kg）麻醉，取股动脉血，室温静置6 h，4℃条件下，3000 r/min离心10 min，取其血清，NO检测采用硝酸还原法，Na+-K+-ATP酶活性检测采用无机磷含量的方法，均严格按照试剂盒说明书步骤进行。

1.8 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件。计量资料以（±s）表示。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组对大鼠给药前后心率比较 见表1。与空白对照组比较，模型对照组大鼠心率明显降低（P＜0.01），与模型对照组相比，中、高剂量组，大鼠心率明显升高（P＜0.01）。

表1 各组大鼠给药前后心率比较（次/min，±s）

表1 各组大鼠给药前后心率比较（次/min，±s）

与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与空白对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

组 别 n 给药前 给药后空白对照组 12 400.00±18.00 383.71±8.32模型对照组 12 391.78±24.00 290.42±29.06△△心宝丸组 12 380.77±23.00 326.63±14.03**低剂量组 12 381.70±21.08 300.34±10.03中剂量组 12 378.02±12.90 315.72±14.77**高剂量组 12 380.21±12.29 316.33±18.48**

2.2 各组对大鼠NO含量、Na+-K+-ATP酶活性的影响 见表2。与空白对照组比较，模型对照组NO含量增加（P＜0.05），与模型对照组比较，低剂量组大鼠血清NO含量降低（P＞0.05），差异无统计学意义；中、高剂量组大鼠血清NO含量降低（P＜0.05）。与空白对照组比较，模型对照组Na+-K+-ATP酶活性降低 （P＜0.01），与模型对照组比较，低、中剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性升高（P＜0.05），高剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性明显升高（P＜0.01）。

3 讨 论

缓慢性心律失常的形成机制有两种：一种是自律性异常，包括窦性心动过缓、窦性停搏和病态窦房结综合征；另一种是传导性异常，包括窦房传导阻滞、房室传导阻滞以及室内传导阻滞。临床表现为不同程度的心悸气短、胸闷隐痛、头昏乏力、动则加重，严重者出现Adams-Stokes综合征。

表2 各组大鼠血清NO含量、Na+-K+-ATP酶活性比较（±s）

表2 各组大鼠血清NO含量、Na+-K+-ATP酶活性比较（±s）

组 别 n NO（μmol/mL） Na+-K+-ATP酶活性空白对照组 12 36.93±4.08 0.398±0.070模型对照组 12 39.82±2.89△ 0.241±0.051△△心宝丸组 12 35.56±6.89* 0.279±0.039*低剂量组 12 37.83±3.85 0.288±0.049*中剂量组 12 36.72±3.15* 0.289±0.044*高剂量组 12 36.45±3.82* 0.332±0.050**

NO又叫血管内皮舒张因子，普遍存在于脊椎动物各个细胞中，能刺激血管平滑肌细胞舒张，参与神经递质和机体免疫的调节，通过介导迷走神经作用，可激活水溶性鸟苷酸环化酶，提高环磷酸鸟苷（cGMP）浓度，cGMP浓度的提高引起抑制心脏活动，表现为负性肌力、负性传导、负性频率。笔者在前期对扶正助脉方的动物实验研究中发现［4］，扶正助脉方可以降低心肌匀浆中cGMP的浓度，但由何种物质介导并不清楚。本次实验研究发现，与模型对照组相比，中、高剂量组大鼠血清NO含量降低（P＜0.05），提示很可能是NO介导的细胞信号转导，使cGMP浓度降低从而达到提高心率的作用。Na+-K+-ATP酶活动的生电性，所形成的跨膜离子浓度与心肌细胞自律性密切相关，心肌细胞自律性的高低最主要取决于动作电位4期自动去极化的速度。现代医学研究表明，Na+-K+-ATP酶活性降低会导致心肌细胞自律性、传导性以及离子通道的异常，提示可能与缓慢性心律失常发生有关［5］。本实验研究表明，与模型对照组比较，低、中剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性升高（P＜0.05），高剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性明显升高（P＜0.01），说明扶正助脉方可以使Na+-K+-ATP酶活性增高。

扶正助脉经验方，临床已使用多年，对缓慢性心律失常患者有良好作用，该方由桂枝、党参、淫羊藿、苏木、地龙、清半夏、薤白、连翘、鸡血藤等12味中药组成。全方重点突出温养心经、疏通心络、祛瘀行滞、化浊排毒之功效。通过促进机体脏腑的阴阳气血、虚实正邪逐渐趋向平衡，改善阳虚大鼠紊乱的内环境，从而促使阳虚大鼠向正常发展［6］，同时本经验方可改善由心肾阳虚引起的缓慢性心律失常大鼠心功能和心肌细胞代谢，有利于促进心脏窦房结的营养状况、改善窦房结功能，是改善心功能、治疗缓慢性心律失常的有效制剂。由于本次实验周期和条件有限，对于复方中具体是哪味药使Na+-K+-ATP酶活性增高及NO的来源未能研究，这也将是下一个研究重点。

［1］杨霓芝，包昆，王立新，等.通脉口服液对大鼠慢性肾炎“气虚血瘀证”模型的组织形态学影响［J］.中国中医药信息杂志，2001，8（3）：31-32.

［2］陈英华，欧阳轶强，孙琪，等.肾阳虚证动物模型规范化研究中诊断指标选择的初步探讨［J］.中国中医基础医学杂志，2003，9（10）：26-30.

［3］梁君昭，李逢春，张佩.扶正助脉方对阳气虚衰血瘀证心动过缓大鼠作用的实验研究［J］.陕西中医，2011，32（7）：915-916.

［4］程晓昱，胡业彬，吴和，等.心复康对缓慢性心律失常大鼠的实验研究［J］.中国中医基础医学杂志，2006，12（10）：741-743.

［5］姚泰.生理学［M］.北京：人民卫生出版社，2001：113-116.

［6］张恩户，李有林，于克惠，等.从阴阳自和谈中药调整作用［J］.现代中医药，2003，23（5）：1-3.