张大维 邴国强 甘振威 徐彩云 李萍 郭超

实验动物饲料的标准化和无菌化是实验动物清洁化、无菌化的基础和必要条件。实验动物要达到清洁级以上标准，饲料不仅要符合国家GB14924.2—2001[1]的营养标准，而且要达到无菌的要求。灭菌是指杀灭或除去环境中一切微生物的过程[2]。选择有效的灭菌方法，是实验动物饲料达到无菌标准的保证。颗粒饲料的灭菌方法要求其具有灭菌效果可靠、穿透力好、方法简单、可普遍使用、成本较低、对饲料中营养成分损失小、无毒副作用的特点[3－5]，达到这一要求的灭菌方法，目前只有高压蒸汽灭菌和60 Co－γ射线照射灭菌[2]2种方法。本实验是探讨如何正确使用这两种灭菌方式对鼠颗粒饲料进行灭菌，在保证营养成分损失最少的情况下，达到无菌化的标准。

1 材料和方法

1.1 材料

直径12 mm鼠颗粒饲料，来源于长春市绿园区益生实验动物饲料厂。

1.2 仪器与试剂

高压蒸汽灭菌器（长春华日）、60 Co－γ射线源(长春应化所)、智能干燥箱（杭州DHG900）、超微粉碎机（浙江 CWJ）、恒温培养箱（上海 XMT－A7000）、洁净工作台（武汉 CJ1300S）、消化器（北京 ADE－V）、电子秤（T1000）、荧光分光光度计（上海970CRT型）、定氮仪（上海KDN－04A）、原子吸收分光光度计（上海AA320N）、脂肪测定仪（上海 SZF－06A）、粗纤维测定仪（上海 CXC－06）、马弗炉（沈阳SM－2.8－10）。

营养琼脂培养基 (按GB/T4789.28—2003规定制作)、磷酸盐缓冲液(按 GB/T4789.28—2003[1]中 3.22 规定)、0.9%灭菌生理盐水、75%乙醇。

1.3 方法

1.3.1 灭菌效果实验方法

1.3.1.1 鼠颗粒饲料样品的分组

将直径12 mm鼠颗粒饲料样品分为11组，每组50 g。采用高压蒸汽灭菌方法灭菌的饲料，按灭菌时间（15、20、25、30、35 min）分为 5 组，即实验 1～5 组；……