联合检测炎症因子IL-6、TNF-α和 MCP-1对冠心病临床诊断价值
2012-05-30令狐颖刘志琴
黄 山,张 程,陈 艳,令狐颖,许 健,刘志琴
(1.贵州省人民医院a.临床检验中心;b.心内科,贵州 贵阳550002;2.贵阳医学院09级硕士研究生)
冠状动脉粥样硬化性心脏病指冠状动脉粥样硬化使血管腔狭窄或阻塞,或(和)因冠状动脉功能性改变(痉挛)导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病。“炎症假说”是动脉粥样硬化主要发病机制[1],白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)等炎症性因子在其过程中发挥着重要的作用。目前流式细胞仪在临床上的应用不断扩大,鉴于此本研究应用荧光微球编码技术,建立了流式微球分析技术(cytometric bead assay,CBA)联合检测IL-6、TNF-α和 MCP-1的方法,对冠心病患者血清进行检测,发现其对冠心病的诊断具有一定的临床应用价值,现报道如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源
血清标本采自2010年8月-2011年5月贵州省人民医院心内科住院病人和健康体检者。清晨空腹采血,3 000rpm×10min分离血清,-70℃保存待检。正常对照组收集50例,男30例,女20例,年龄35-55岁,平均年龄43±2.26岁,均来自各项体检指标正常的健康人群;冠心病组收集150例,男85例,女65例,年龄35-81岁,平均年龄52±1.35岁,稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组血清标本各50例,经冠状动脉造影术等检查确诊。
1.2 主要试剂和仪器
BD Array流式细胞仪,酶标仪和洗板机(均为北京 普 朗 公 司 产 品),人 IL-6、TNF-α 和 MCP-1 ELISA检测试剂盒(R&D公司产品,批号分别为CK-E10140H、CK-E10110H 和CK-E10136H)等。
1.3 方法
采用SPSS13.0软件设计正交试验表和进行试验结果方差分析,对IL-6、TNF-α和 MCP-1 3种鼠抗人单克隆抗体联接羧基化微球的最佳联接量、PE标记的亲和素的稀释倍数和洗涤次数以及孵育时间、生物素标记抗体的稀释倍数和洗涤次数及孵育时间等验条件进行优化选择。……
