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靶向Xklp2靶蛋白和极光蛋白在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

2012-05-25申海龙,梁朝辉,耿少梅

中国神经精神疾病杂志 2012年11期

细胞有丝分裂受多种蛋白调控,其中,靶向Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesinlike protein 2,TPX2)是一个受细胞周期严格调控的核增殖蛋白,参与细胞有丝分裂过程中纺锤体微管的组装和调控[1-4]。极光蛋白(serine/threonineprotein kinase 6,Aurora-A)作为与中心体相关的原癌基因,主要参与细胞有丝分裂的调控,TPX2是Aurora-A靶向到纺锤体装置所必需的。有证据表明[3]TPX2、Aurora-A 的过表达能够促进肿瘤细胞恶性增殖。然而,TPX2和Aurora-A在胶质瘤发生发展过程中的变化及其与临床病理特征的关系尚不明确,本研究拟采用免疫组织化学方法对50例手术切除的胶质瘤组织及10例正常脑组织标本中TPX2和Aurora-A蛋白表达情况进行检测,探讨TPX2和Aurora-A在胶质瘤发生发展中的作用及其意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 河北医科大学第二医院神经外科2010年5月至2011年5月手术切除的50例脑胶质瘤标本,10例对照脑组织取自因颅脑损伤行内减压术者。标本常规石蜡包埋切片,HE染色。所有标本经病理科确诊,术前均未行过放化疗,有完整的临床病理资料和随访资料。50例胶质瘤患者中,男28例,女22例;年龄15~68岁,平均(34±4)岁。按WHO(2007年)分级标准分级:Ⅱ级25例,Ⅲ级12例,Ⅳ级13例,其中Ⅱ级为低级别,Ⅲ-Ⅳ级为高级别。试剂:TPX2兔抗人单克隆抗体,于Bioworld technology公司购买。Aurora-A单克隆抗体购于Epitomics公司,SP免疫组织化学试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。

1.2 Aurora-A和TPX2免疫组织化学染色方法

将术中所取胶质瘤和正常脑组织标本进行脱水、包埋、切片、脱蜡、修复、分别加入一抗、二抗、三抗,DAB显色,苏木精复染,封片,在显微镜下观察。其中TPX2与Aurora-A抗体稀释倍数分别为1∶100和1∶100,二者修复条件均为枸橼酸热修复。……

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