王婷　马云

[摘要] 目的 评价Bcl-2在三阴性乳腺癌中的预后意义。 方法 本研究纳入三阴性乳腺癌改良根治术后患者68例，应用Kaplan-Meier生存曲线分析患者总生存（OS）和无病生存率（DFS），并应用Log-rank检验Bcl-2对患者预后价值。 结果 本组病例中Bcl-2阳性20例，占29.4%。Bcl-2阳性组的中位生存期为（76.0±5.7）个月，而Bcl-2阴性组中位生存期仅为（64.0±5.5）个月（P = 0.040）。Bcl-2阳性组中位DFS为（35.0±2.2）个月，而阴性组为（28±2.8）个月（P = 0.036）。 结论 Bcl-2在三阴性乳腺癌中表达较低，是其预后因素之一。

[关键词] 乳腺癌；Bcl-2；预后

[中图分类号] R737.9[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）29-0044-03

乳腺癌是女性最常见的肿瘤，依据人类表皮生长因子受体2亚型（HER2）、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）等表达与否，可以分为不同亚型[1]。三阴性乳腺癌是指ER、PR以及HER2均为阴性的乳腺癌，约占乳腺癌的12%～15%[2-4]。应用基因表达谱分子分型，提示大部分三阴性乳腺癌为基底细胞样乳腺癌。和非三阴性乳腺癌相比更好发于年轻女性，组织分化级别更高，增殖细胞比例更高。因此预后也较非三阴性乳腺癌差，容易发生远处转移和局部复发，对内分泌治疗和抗HER2靶向治疗均抵抗[2-4]。

Bcl-2于20世纪80年代初被发现是造血系统肿瘤的一个原癌基因， 是一种较为肯定的抗细胞凋亡基因并且受雌激素调节，表达于正常腺上皮组织，但约有60%～80%的乳腺癌存在Bcl-2过表达。Bcl-2过表达被认为是乳腺癌预后良好的因素之一[5]。但是Bcl-2在三阴性乳腺癌预后预测价值研究报道极少，我们通过回顾性分析研究Bcl-2在三阴性乳腺癌中是否存在预后价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

以我中心2000～2008年间手术切除的所有乳腺癌病例为筛选对象。纳入标准：①女性；②经病理学明确的侵袭性乳腺癌；③免疫组织化学检查HER2（HER2阴性指的是免疫组化阴性或+），ER、PR均为阴性；I、II、III期乳腺癌患者。IV期乳腺癌和组织学证实为非侵袭乳腺癌的病例排除。淋巴结和肿瘤大小分期参照第六版美国癌症联合委员会（AJCC）乳腺癌TNM分期系统[6]。阳性淋巴结个数分组：N0（0个）；N1（1～3个）；N2（4～9个）；N3（≥10个）。肿瘤大小分组：T1（肿瘤最大径≤2 cm）；T2（肿瘤最大径2～5 cm）；T3/4（肿瘤最大径≥5 cm或不管肿瘤大小，肿瘤直接侵犯皮肤或胸壁）。符合纳入标准和不符合排除标准病例，通过医院电子病历档案及纸质档案获得患者的一般资料、临床资料、放射学资料、病理资料等。其中病理资料包括肿瘤大小、阳性淋巴结个数等。

1.2 随访

通过电话、书信以及上门等方式获取患者生存和进展情况。

1.3 免疫组化

石蜡标本连续切片4 μm厚，进行HE染色和S-P法免疫组化染色。抗Bcl-2抗体购自上海蓝基生物科技公司。免疫组织化学染色按说明书操作，DAB显色，设阳性和阴性对照。参考既往文献，肿瘤细胞染色超过5%即认为Bcl-2阳性。

1.4 统计学方法

所有数据录入SPSS 16.0统计分析软件包。总生存时间（Overall survival，OS）定义为患者确诊至死亡时间或者最后一次随访时间，无病生存时间（Diesease free survival，DFS）定义为确诊至乳腺癌复发或任何原因死亡时间。计量资料以均数±标准差表示，应用方差分析。计数资料表示为计数和百分数，应用卡方检验。DFS和OS采用Kaplan-meier生存曲线评价，组间的生存差异应用Log-rank检验。P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病例资料

符合条件病例共112例，其中78例获得随访资料，可获得组织标本行免疫组化共68例，纳入研究68例。该组68例患者，中位年龄59.5岁，平均（58.3±10.3）岁（33～76岁）。依据第6版乳腺癌TNM分期，其中I期4例（5.9%），II期32例（47.1%），III期32例（47.1%）。术后接受辅助放疗的占63.2%（n = 43），未接受放疗36.8%（n = 25）。Bcl-2阳性20例，占29.4%，阴性48例，占70.6%。见表1。

表1 病例资料

2.2 DFS和OS

至随访结束时，共有46例死亡或失访，占67.6%。其中有91.2%（62例）患者出现复发或转移。中位OS和中位DFS分别为（66.0±4.1）个月[95%CI，（57.8～74.1）个月]和（32.0±1.9）个月[95%CI，（28.2～35.7）个月]。5年生存率为62.1%（图1），而三年无病生存率为28.1%（图2）。

2.3 Bcl-2对OS的影响

以阳性细胞占所有肿瘤细胞超过5%定义为染色阳性，Bcl-2阳性20例，阴性48例。Bcl-2阳性组预后较阴性组好，其中位生存期分别为（76.0±5.7）个月[95%CI，（64.7～87.2）个月]和中位生存期仅为（64.0±5.5）个月[95%CI，（53.2～74.7）个月]，经检验P = 0.040，差异有统计学意义（图3）。

2.4 Bcl-2对DFS的影响

本组病例中，Bcl-2阳性组中位DFS较阴性组长，分别为（35.0±2.2）个月[95%CI，（30.6～39.3）个月]和（28±2.8）个月[95%CI，（22.4～33.5）个月]，经检验P = 0.036，差异有统计学意义（图4）。

图1 总生存曲线图（n = 68）

图2 无病生存曲线（n = 68）

图3Bcl-2对总生存的影响（P = 0.040）

图4Bcl-2对无病生存的影响（P = 0.036）

3 讨论

本研究中我们评价了Bcl-2在三阴性乳腺癌这一乳腺癌特殊亚群中的预后意义。三阴性乳腺癌的预后较非三阴性乳腺癌差，本组病例中三年内复发的占71.9%，其中位DFS为32个月，中位OS为64个月，5年生存率为62.1%。有研究显示诊断3年内三阴性乳腺癌的大部分患者出现复发，这和本研究的结果类似[2]。

Bcl-2属胞浆蛋白，与凋亡和肿瘤发生发展有关。在发育过程中，Bcl-2在所有组织中都有表达。但在成人中仅保守细胞和增殖细胞才表达。在侵袭性乳腺癌中，Bcl-2表达率达60%～80%[7，8]。在本组三阴性乳腺癌组中，有20例Bcl-2阳性，表达率为29.4%，和非三阴性乳腺癌相比Bcl-2表达较低，与Kallel-Bayoudh等研究结果相似[9]。

Bcl-2是乳腺癌预后因素之一。Rolland等[10]研究显示Bcl-2高表达的患者有更长的生存期，且Bcl-2表达与ER受体的表达呈正相关[11，12]，而ER受体是乳腺癌预后良好的指标之一，因此也支持Rolland等结果。而在本组三阴性乳腺癌患者，Bcl-2无论对DFS还是OS都有预测价值，Bcl-2阴性的患者更容易复发，且生存期更短。该结果与普通乳腺癌中各研究的结果相同

总之，本研究显示Bcl-2在三阴性乳腺癌中具有重要作用，既有预测复发的价值，也是预后良好的指标之一。在三阴乳腺癌中Bcl-2的表达较非三阴性乳腺癌表达低。由于本中心条件限制、样本量较小，且为回顾性研究，研究结果可能存在误差，因此有必要开展前瞻性、多中心的研究。

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（收稿日期：2012-06-07）