表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、侵袭和cripto蛋白表达的影响
2012-04-13
(江苏大学附属人民医院,江苏镇江 212002)
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率较高,主要原因是发现时即已有癌细胞侵袭和转移。茶多酚是茶叶中三十多种多酚类物质的总称,是一种从绿茶中提取的纯天然混合物,主要由四大类物质组成,其中以儿茶素最为重要,占多酚类总量的60% ~80%,儿茶素类主要由表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯等几种单体组成,其中以EGCG的含量最丰富。研究发现,EGCG在体内外对许多肿瘤细胞增殖具有抑制作用[1~5],但是对胃癌细胞侵袭研究甚少,抗癌机制亦不完全清楚。2012年1~3月,我们观察了EGCG对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。
1 材料与方法
1.1 材料 EGCG(Sigma公司),用二甲基亚砜(DMSO)配成储液,-20℃冰箱保存;实验时用RPMI1640培养基稀释,DMSO的最终浓度<0.9%;人胃癌BGC823细胞株,本院组织细胞生物库冻存,购自中科院上海细胞所细胞库;Trizol试剂购自Invitrogen公司;BCA蛋白分析试剂盒购自Pierce公司;基底膜胶购自BD公司。RPMI1640、新生小牛血清均购自Gibco公司。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养及处理 人胃癌BGC823细胞置于含10%胎牛血清的RPMI1640液中,37℃、CO2培养箱中培养。每日观察,待细胞至对数生长期,实验组加入20、40、80 μmol/L 的 EGCG 处理,对照组以RPMI1640代替EGCG处理细胞,备测。
1.2.2 细胞迁移能力检测 采用划痕法。先用marker笔在6孔板背后,均匀划横线,每隔0.5~1 cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。取对数生长期细胞消化、计数,使用培养基配制成浓度为8×105个/mL的细胞悬液,6孔细胞培养板中每孔加入1 mL细胞悬液,放入37℃,5%CO2培养箱中培养直至细胞铺满单层。……
