王丹妹，何 佟，吉丽敏，翁 阳，莫燕娜

(海南医学院，海口571101)

研究证明经典的热应激预处理(42℃)可诱导热休克蛋白(HSP)表达增加，对肠缺血—再灌注损伤(IR)有保护作用［1］。但其他温度热应激预处理肠IR的影响尚不明确。2010年7月～2011年12月，我们观察并比较了38.5～39℃、40～40.5℃、41.5～42℃全身热应激预处理后大鼠肠黏膜HSP水平、Caspase-3活性及肠黏膜细胞凋亡情况。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 SD雄性大鼠50只，体质量200～230 g，购自于河南省实验动物中心，随机分为5个组。A组为正常体温+假手术对照组，B组为正常体温+肠IR组;C组为38.5～39℃热应激+肠IR组，D组为40～40.5℃热应激+肠IR组，E组为41.5～42℃热应激+肠IR组。

1.2 试剂与设备 鼠抗诱导型HSP70(HSP72) mAb(SPA-810)(美国Stressgen公司);鼠抗β-actin mAb(南京建成生物工程研究所提供);DAB显色试剂(武汉博士得生物工程公司);细胞凋亡原位末端标记法(TUNEL)试剂盒(购自北京中杉金桥生物技术有限公司);Caspase-3 Colorimetric Assay(购自美国R＆D公司)。Stat Fax-2100型酶标仪(美国AWARENESS);光学显微镜(日本Olympus)。

1.3 全身热应激预处理方法 大鼠用3%戊巴比妥钠(1.5 mL/kg体质量)腹腔注射麻醉。C组置于45℃恒温水浴箱中，使其肛温在20 min内达到38.5～39℃，然后移至事先已经调温好的39℃水浴箱中并维持10 min;D组置于50℃恒温水浴箱中，使肛温20 min内达到40～40.5℃，维持10 min;E组置于55℃恒温箱中，使肛温在20 min内升至41.5～42℃，维持10 min，取出置室温24 h;A组和B组不进行热应激预处理。

1.4 大鼠肠缺血—再灌注损伤模型制作方法 大鼠预先禁食12 h，但可自由饮水。用3%戊巴比妥钠(1.5 mL/kg体质量)进行腹腔注射麻醉。取正中切口，分离出肠系膜上动脉(SMA)，室温静置10 min。B、C、D、E组用微动脉夹夹闭系膜上动脉，30 min后轻轻取出动脉夹，自然恢复血液重新灌流。……