非小细胞肺癌患者癌组织、外周血中hnRNP A2/B1 mRNA的表达变化
2012-04-13龙颖颖颜春松
龙颖颖,古 艳,李 羲,颜春松
(1南昌大学第二附属医院,南昌330006;2南昌大学第三附属医院;3海南医学院附属医院)
肺组织病理学检查是诊断肺癌的金标准,但该检查为有创操作,可能导致患者病情加重,且部分肺癌晚期患者难以取得癌组织标本。因此,寻找一种无创且有助于肺癌早期诊断的方法具有重要意义。随着分子生物学的迅猛发展,越来越多的学者将研究的重点转向肿瘤标志物的监测,现在已发现与肺癌有关的肿瘤标志物有10余种。异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)是一种癌生长蛋白,与非小细胞肺癌(NSCLC)的发生发展密切相关[1]。本研究观察了hnRNP A2/B1基因在NSCLC患者外周血单个核细胞及癌组织中的表达变化,并探讨其意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 NSCLC患者37例(肺癌组),男29例、女8 例,年龄(63.49±13.76)岁;均未行放化疗及其他抗肿瘤治疗,于2009年12月~2011年12月行手术治疗留取癌组织,经病理检查确诊。其中鳞癌26例,腺癌8例,大细胞癌2例,肉瘤1例;TNM分期Ⅰ~Ⅱ期16例,Ⅲ~Ⅳ期21例。肺部良性病变20例(良性组),男16例、女4例,年龄(57.32±15.69)岁;其中间质性肺炎16例,肺囊肿4例。两组性别、年龄具有可比性(P均>0.05)。
1.2 hnRNP A2/B1基因检测方法
1.2.1 RNA的提取 取100 mg新鲜肺病变组织标本匀浆,加1 mL Trizol混匀,室温放置5 min;加入氯仿0.2 mL,剧烈震荡15 s,室温放置3 min。4℃10 000 r/min离心15 min,样品分成黄色的有机相、中间层和上层无色的水相。把水相移到新EP管中,加入等体积异丙醇,混匀,-20℃放置20 min。4℃ 10 000 r/min离心10 min,去上清可见白色絮状物即RNA。加入75﹪乙醇1 mL(用无核酶水配置)洗2次。室温放置晾干,加入无核酶水20 μL充分溶解RNA,电泳检测提取RNA的质量及效果。……
