王春雨，迟乃玉*，张庆芳

（大连大学 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116622）

低温脂肪酶具有高效、耐热、作用周期短等优势，在应用上具有中高温脂肪酶无法取代的优越性，因此低温脂肪酶广泛的应用在食品、轻纺、皮革、香料、化妆品、洗涤剂、有机合成、医药等领域上。国外研究者对其中几种典型的脂肪酶如来源于Candida rugosa[6]、Candida antarcticaA[7]、CandidaantarcticaB[8]、Rhizomucor miechei[9]、Thermomyces lanuginosus[10]的脂肪酶的应用进行了详细的综述，这些脂肪酶在油脂加工和食品工业、寿星药物合成、生物能源、医药和化妆品等行业显示出良好的前景。相比于国外，国内目前只有作为洗涤剂的碱性脂肪酶，而酯化或转酯化用的脂肪酶还是空白。

本文从大连大黑山和渤海湾采样，筛选产低温脂肪酶的菌株，并对其产酶条件进行研究。

1 材料与方法

1.1 土样来源

渤海湾海水和大连大黑山土样。

1.2 培养基

Luria-Bertani（LB）培养基[11]：胰蛋白胨1.0%，酵母提取物0.5%，NaCl 1.0%，琼脂1.5%，pH7.0。

初筛培养基：蛋白胨1.0%，酵母粉0.5%，NaCl 0.5%，CaCl20.02%，Tween80 1.0%，pH7.2。

发酵培养基：酵母膏0.5%，（NH4）2SO40.5%，KH2PO40.2%，NaCl 0.3%，MgSO4·7H2O 0.05%，橄榄油2%（v/v），pH7.0。

在教学中，建立关系的前提是师生之间发生交流和交往，但现在的许多课堂，只是单向的教师讲授、学生接收。教师的注意力主要在“教”，没有注意到在“教”的过程中与学生发生交流和交往，建立某种超越客观知识的情感关系。我试图强调的是，在“教”的过程“之中”发生了什么。当前，我们没有很好地区别什么是教师关注自己的教学本身，什么是关注教学“之中”发生的事情。这个区别不是特别明显，但同时这个区别又是巨大的。

牛肉膏蛋白冻培养基：牛肉膏0.3%，蛋白胨1.0%，Na-Cl 0.5%，琼脂1.8%，pH7.0。……