陈启斌 荚卫东

自1998年由Fire等[1]首次发现基因沉默现象以来，RNA干扰技术发展迅速，RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指由与靶基因序列同源的双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。

原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，是多因素、多阶段、多基因相互作用的结果，包括病毒感染、致癌物的作用、癌基因的激活和抑癌基因的失活、细胞的凋亡和增殖调节失控、修复基因结构和功能缺陷等[2]。在其癌变、增殖、转移、复发等一系列过程中伴随着不同阶段的癌基因或抑癌基因变异，引起相关因子表达的紊乱。针对这些生物学特性，已经有许多RNA干扰技术应用于肝癌的基因治疗与研究。RNAi因其特有的高效性、特异性、低毒性，为肝癌基因治疗的研究开辟了一条新的途径。

一、RNAi概述

（一）RNAi的发现 1995年Guo等[3]人在阻断秀丽新小杆线虫中par-1基因表达的研究中发现，对照实验组注射正义RNA不但不增加该基因的表达，反而产生与反义RNA同样的结果，即特异性阻断该基因的表达。1998年，由Fire等[1]证实，正义RNA抑制基因表达的现象是由于体外转录的RNA中污染了少量dsRNA而引起的，并发现纯化后的dsRNA具有比正义链或反义链更强的基因沉默效应，故将dsRNA能导致转录后基因沉默的这一现象首次称为RNAi现象。随后在一些植物和低等无脊椎动物中陆续发现RNAi效应存在[4]。早期研究者采用较长序列的dsRNA总是导致基因的非特异性抑制，以致认为在哺乳动物细胞中是不能以RNAi技术诱导特异性基因抑制的[5]。……