汪志峰,张 毅,马宝君,虞 昊

(南通大学第二附属医院,1.神经外科;2.心胸外科,江苏南通,226001)

神经生长因子(NGF)是人类发现的第一个神经营养因子家族成员,也是最重要的一个因子,其在神经细胞体外培养模型中能提高培养神经元的活性,表现出良好的保护受损神经元,促进神经元生长的作用[1]。本研究通过观察NGF对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后氧自由基、炎性细胞因子和神经元凋亡的影响,研究NGF对脑缺血后的神经保护作用机制,为进一步应用于临床提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

健康雄性清洁级SD大鼠共36只,体重250～300g,由南通大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证号:SCXK(苏)2001-0011。凯基原位末端标记(TUNEL)细胞凋亡原位检测试剂盒(BIOTIN标记POD法,石蜡切片专用);考马氏亮兰蛋白试剂盒(南京建成生物工程研究所);超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所);双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组:36只大鼠随机分成3组,即假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IR)组、NGF治疗组,每组12只。Sham组:麻醉及手术同IR组,只暴露右侧颈总动脉而不做其他操作; IR组:阻断右侧大脑中动脉120 min后开放,不做其他操作;NGF组:同样阻断大脑中动脉120 min,然后在开放的即刻肌注NGF 1 000 U(2 mL生理盐水溶解),假手术组和脑缺血组肌注等量生理盐水。

1.2.2 实验动物模型制作:参考Longa线栓法[2]制作大鼠右侧大脑中动脉可逆性闭塞模型。采用动物的神经功能缺损评分(NDS)作为模型成功与否标准。……