李雪丽，文李艳，冯善伟，钟 梅，刘艳君＊，富 宁

（1.南方医科大学基础医学院 免疫教研室，广东 广州 510515；2.广州市人口和计划生育科学研究所，广东 广州 510410；3.南方医科大学 南方医院，广东 广州 510515）

胎儿血红蛋白（Fetal Hemoglobin，Hb F）由2条α链和2条γ链组成，出生时约占血红蛋白总量的70%，然后快速减少，6－12个月后浓度小于2%，到成年时降至血红蛋白总量的1%以下。在许多血液系统疾病尤其是β地中海贫血的筛查中，检测Hb F是一项不可或缺的指标［1］。在某些恶性肿瘤中，Hb F可作为肿瘤标记物预示肿瘤的发生发展［2］。在产科疾病中，检测HbF可以快速判定胎儿向母体出血等疾病［3］。目前检测Hb F多采用蛋白质电泳、抗酸染色和碱变性法，这些方法灵敏度比较低，而灵敏度和准确度较高的高效液相色谱法价格昂贵，不适合大规模筛查［4］。本研究利用自制的抗人Hb F单克隆抗体和兔抗人Hb F多克隆抗体，建立了HbF的单多抗夹心ELISA检测体系。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 抗人HbF单抗2C8、多抗均由本室自制［5］，HRP－羊抗兔IgG为北京鼎国生物公司产品；BSA购自广州斯佳生物技术公司。自行配制以下试剂：红细胞裂解液（Tris－NH4Cl）包被液系0.05 M 碳酸盐缓冲液（CB，p H9.6）、ELISA 封闭液（5%脱脂奶粉，用洗液配制）、洗液（50m MTris，0.14 M NaCl，0.1%Tween－20，p H8.0）、样品稀释液（50 m M Tris，0.14 M NaCl，1%BSA，0.05%Tween－20，p H8.0）、TMB底物液（临用前 A、B液等体积混匀）、2M H2SO4终止液均自行配制。

1.1.2 主要仪器 多功能酶标仪Perkin Elmer wallac1420；自动洗板机购自美国BIO－RAD公司；37℃数显三用恒温水浴箱，购自金坛市医疗仪器厂。

1.1.3 血液样本 脐带血取自南方医院产前诊断中心，标准品为本实验室工作人员的全血标本；100份血标本取自广州市人口和计划生育科学研究所，以上标本均用高效液相色谱法测定其 含量，于－70℃保存。……