黄柏提取物在体外vero细胞中对单纯疱疹病病毒2型的抑制作用
2012-02-24彭立新姜良英
李 涛,彭立新,姜良英
(大庆油田总医院 皮肤科,黑龙江 大庆 163001)
生殖器疱疹[1,2]是我国常见性传播病之一,由单纯疱疹病毒(HSV)感染所引起。目前国内外研究的抗病毒药物已接近50种[3],以阿昔洛韦(ACV)为代表的核昔类药物成为治疗HSV感染的标准药物和一线用药。
黄柏为芸香科植物黄檗或黄皮树的干燥树皮,黄柏味苦、性寒,能清热燥湿,泻火解毒,消肿祛腐。临床上用于治疗湿热泻痢、黄疸、风疹瘙痒及疮疡后伤口感染属阳证者。近年研究发现黄柏具有免疫抑制、降压、抗癌、抗氧化及抗病毒等新的药理活性。本实验研究旨在了解评价黄柏提取物在体外系统抗单纯疱疹病毒2型的活性,为开发治疗单纯疱疹的新药奠定基础。
1 试验材料
黄柏提取物(西安市天园生物制剂厂);注射用阿昔洛韦(ACV浙江诚意药业有限公司);vero细胞(上海细胞生物研究所细胞库);HSV-2型质控株(sav株)(北京中国药品生物制品检定所)。
2 试验方法
2.1 浓度设置
黄柏提取物粉:在最大无毒浓度下,以溶媒稀释药物,受试终浓度为10、5、2.5、1.25、0.62、0.31 mg/ml 6个浓度。
对照药ACV:以溶媒稀释,受试终浓度为5,2.5,1.25,0.62,0.31,0.15μg/ml 6个浓度。
2.2 HSV接种
Vero细胞以2×105个/ml接种至96孔细胞培养板,每孔0.1 ml,37℃,5%CO2培养,细胞长成单层后进行实验。HSV-2原液分别用细胞维持液依次10倍稀释成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7和10-88个稀释度。
上述各稀释度病毒液分别加入已成单层的Vero细胞培养板,每孔0.1 ml,每稀释度4个复孔,37℃,5%CO2培养,实验设正常细胞对照。24 h后倒置显微镜下观察细胞病变,计算病变细胞占全部细胞的百分率及平均细胞病变百分率。……
