沈 磊，崔文玉，陈汝筑，汪 海

(1.军事医学科学院卫生学环境医学研究所，北京 100850;2.中山大学中山医学院药理学系，广东广州 510080)

失敏(desensitization)是指在反复或长时间激动剂刺激下，生物学反应降低或消失的一种可逆现象，被认为是一种暂时性失活［1］。作为第1个被发现具有失敏过程的受体，烟碱样乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor，nAChR)是一类含半胱氨酸环的配体门控离子通道受体，由5个亚基构成［2］。在中枢神经系统广泛分布的1个N受体亚型是α7型烟碱样乙酰胆碱受体(α7-nAChR)，它由5个相同的α亚单位组成，以快失敏和对钙离子的高通透性而有别于其他类型的N受体［3－4］。快失敏这个特征具有很重要的作用，在生理状态下参与了细胞保护，避免细胞受激动剂作用后的过度兴奋，也参与了神经递质释放的调节，并参与了突触可塑性对其他受体功能的调节。病理条件下参与了长期吸烟后的成瘾症状和有机磷中毒症状［5－6］。所以研究 α7-nAChR的失敏特征有助于理解失敏态N受体的特殊功能。本文使用膜片钳全细胞记录方式来探讨α7-nAChR的特异激动剂——胆碱对海马神经元中含α7-nAChR失敏过程的影响。

1 材料与方法

1.1 新生大鼠海马神经元培养 取12 h内出生的Sprague-Dawley大鼠，经75%乙醇浸泡消毒后，取全脑放入0℃的高糖DMEM培养液中冲洗，在解剖显微镜下分离出海马组织，并仔细剥离附着血管膜和皮层组织，然后用小镊子将海马捣碎，放入含2 g· L－1木瓜蛋白酶的DMEM培养液中，于37℃、5%二氧化碳孵箱中消化20 min，用含血清的DMEM/F12培养液中止消化，然后以1 000 r·min－1离心5 min，弃上清……