张艳梅，王佃亮，曾虹燕，王烈明，孙晋伟，张珍，东莎莎

1 中国人民解放军第二炮兵总医院中心实验室，北京 100088

2 湘潭大学生物技术研究所，湖南 湘潭 411105

胰岛移植是一种有效治疗糖尿病的方法，但目前用于移植的胰岛主要是来源于尸体捐赠者，来源紧缺和免疫排斥反应严重阻碍了胰岛移植的推广应用，因此寻找可替代β细胞移植的细胞资源成为移植研究的必然趋势。干细胞因其具有自我复制和多向分化潜能成为替代细胞的最佳选择。胚胎干细胞虽然可以诱导分化为胰岛素分泌细胞，但因其伦理争议和形成畸胎瘤的危险而受到阻碍[1]。已有研究证明骨髓[2]、肝[3]、胰胆管[4]、脐带血[5]和皮肤[6]等来源的成体干细胞在体外可以成功诱导分化为胰岛样细胞。相对于以上诸多干细胞，hAMSCs具有取材方便，免疫原性低，增殖能力强和向3个胚层来源的组织细胞分化的潜能等优势[7-8]，在细胞替代治疗领域显现出更为可观的前景。大鼠胰腺部分切除后具有胰腺再生功能，并且胰腺部分切除后的再生胰腺提取物具有激发糖尿病大鼠胰岛再生和血糖恢复的功能[9]，而这种激发再生机制是否和干细胞的诱导机制有关？本课题组利用大鼠胰腺再生提取物对hAMSCs进行了诱导研究。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

达氏修正依氏培养基 (DMEM) (Sigma)；F12 (Sigma)，胎牛血清 (Fetal Bovine Serum，FBS) (Gibico)，胰蛋白酶 (Gibico)，胶原酶Ⅱ和DNaseⅠ (Roche)，重组人碱性成纤维细胞生长因子 (Recombinant human basic fibroblast growth factor，rhbFGF) (Sino)，双硫腙 (Dithizone，DTZ) (Sigma)，小鼠抗人胰岛素抗体 (Boster)，FITC标记的羊抗小鼠IgG (Boster)，凯基Super一步法RT-PCR试剂盒 (凯基生物)，人胰岛素 (INS)试剂盒 (Invitrogen)，SD大鼠 (军事医学科学院动物中心)。……