王 鹏，姜战武，孙玉国，曲 杰

(1承德医学院，河北承德067000;2保定市第一中心医院;3承德医学院附属医院)

木犀草素是一种天然黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在于多种植物中，以全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏含量较高，具有镇咳和祛痰作用，临床上多用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管疾病、治疗炎症性脱髓鞘疾病、SARS、干燥性皮肤瘙痒等［1～5］。近年来对木犀草素抗肿瘤作用的研究主要是其抑制肿瘤的增殖与促进凋亡［6，7］，未见关于其抑制胃癌细胞迁移功能的报道。本研究旨在观察木犀草素对人胃癌细胞系HGC-27细胞体外迁移能力的影响，并探讨其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 人胃癌HGC-27细胞由承德医学院附属医院中心实验室提供。

1.1.2 主要试剂及仪器 RPMI Medium1640培养基干粉和胎牛血清(FBS)为Gibco公司产品，胰蛋白酶为Amersco公司产品，二甲基亚砜(DMSO)、Luteolin、MMP-7及β-actin抗体为Sigma公司产品，辣根过氧化物酶标记的二抗为北京中杉金桥公司产品。Lu溶解在DMSO中，浓度为100μmol/L，－20℃保存，实验中用相应的培养液或溶剂稀释。

1.1.3 仪器 Primo R型低温高速离心机(德国Heraeus公司)，CO2培养箱(美国Forma公司)，倒置荧光显微镜(Zeiss公司)，HFsafe-1500型生物安全柜(HEAL FORCE公司)，Transwell小皿(Millipore公司)，3633型高压消毒锅(美国Yamato scientificwc公司)，HP-8453紫外—可见分光光度计(惠普公司)，梅特勒—托利多AG245电子分析天平(瑞士梅特勒—托利多公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞分组及培养 HGC-27细胞置37℃、5%CO2培养箱，用含10%FBS以及青、链霉素各100 U/mL的RPM1640培养液培养。倒置显微镜观察细胞生长情况，0.25%胰蛋白酶消化传代，取对数生长期细胞接种于6孔培养板，每孔容积1 mL，其中3孔分别加入10、20、40 μmol/L的木犀草素溶液100 μL，分别为A、B、C组，另外3孔加入等量DMSO作为对照(对照组)。……