刘 勇，汪 艳，夏武政，周焕城，高 毅，4

1.湖北医药学院附属人民医院重症医学科，湖北十堰 442000;2.南方医科大学珠江医院再生医学研究所;3.广东省人民医院普外科;4.南方医科大学珠江医院肝胆二科

在线微载体肝细胞荧光示踪研究

刘 勇1，2，汪 艳2，夏武政3，周焕城2，高 毅2，4

1.湖北医药学院附属人民医院重症医学科，湖北十堰 442000;2.南方医科大学珠江医院再生医学研究所;3.广东省人民医院普外科;4.南方医科大学珠江医院肝胆二科

目的拟探讨SYTO/EB在微载体细胞培养中活体细胞原位示踪的应用价值。方法采用活细胞核酸染色剂(SYTO13)和溴化乙啶(EB)2种核酸染色剂对微载体生长的细胞进行双重染色，荧光显微镜下通过颜色不同判断细胞的活力状态并计算出活力百分比。以间接活力测定的四氮唑盐法同时对肝细胞进行活力的检测，并将结果进行比较。结果2种方法测定的结果均可显示微载体生长的肝细胞。但SYTO/EB法更灵敏，可精确计数。结论SYTO/EB测定微载体肝细胞的活力快速、灵敏且简便，并可原位观察细胞的活力，不失为一种可取的微载体活力检测方法。

微载体;染色;活细胞

微载体广泛被用于贴壁细胞的培养中。一系列新型的微载体如多孔微载体被研发，投入到细胞培养、疫苗生产等［1-4］。但目前应用的微载体特别是多孔微载体，由于透光性，而难以在细胞培养时采用常规显微镜观察到细胞分布、细胞形态和活力。多孔微载体呈黄褐色，因而不易将细胞同背景区分［5］。支架内生长的细胞也难以观察。……