包秋华， 吕嫱， 于 洁， 王宏梅， 张和平， 孙天松

（内蒙古农业大学 乳品生物技术与工程教育部重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018）

四川牦牛奶和曲拉中九株乳酸菌的分子鉴定

包秋华， 吕嫱， 于 洁， 王宏梅， 张和平， 孙天松＊

（内蒙古农业大学 乳品生物技术与工程教育部重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018）

为准确鉴定分离自我国四川鲜牦牛奶和曲拉中9株乳酸菌到种水平，作者运用16S r DNA序列分析、rec A基因特异扩增和hsp60－RFLP等多种分子技术对分离自我国四川地区鲜牦牛奶和曲拉中的9株乳酸菌进行分类鉴定。结果证实，16S r DNA序列分析法可将9株乳酸菌初步归类为植物乳杆菌群（4株），肠膜明串珠菌（4株），瑞士乳杆菌（1株）。由于16S r DNA序列分析法不能区分植物乳杆菌和戊糖乳杆菌，为了进一步鉴定植物乳杆菌群中的4株菌，继续采用recA基因特异扩增和hsp60－RFLP技术对其细分，结果表明rec A基因特异扩增和hsp60－RFLP的方法均能很好地把植物乳杆菌群中的4株菌鉴定到种水平，且均为植物乳杆菌。

乳酸菌；分类鉴定；16S r DNA；recA基因；hsp60基因；RFLP

乳酸菌是一类革兰氏阳性、细胞形态为杆菌或球菌、过氧化氢酶为阴性、不形成内生孢子、利用可发酵糖产生50%以上乳酸的细菌的通称［1］。广泛地存在于自然界、动植物体、乳制品和发酵食品中，且大多数为非致病菌，属于有益微生物，具有改善肠道菌群、增强人体免疫力、抗肿瘤、降低血液胆固醇、降血压等功能［2］，是人体正常菌群。牦牛乳和曲拉具有独特的生态学特性和较高的经济价值，同时含有种类丰富的微生物，如可检测到很多属、种的乳酸菌［3－5］。……