曹苏娟 李国亮 张忠山 王小华

肿瘤的侵袭与转移是恶性肿瘤患者预后的1个重要因素。近年的研究[1,2]显示，T淋巴瘤侵袭转移因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam1)在人体乳腺癌、结肠癌、膀胱癌等多种肿瘤中高表达，相似的结果在动物模型中也被证实；并且Tiam1表达增强能诱导并促进肿瘤细胞侵袭、转移。但有关Tiam1在胃癌组织中的表达及其临床意义尚不清楚。我们应用免疫组化方法检测Tiam1在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达，并初步探讨其与胃癌组织TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度、肿块大小等临床病理参数间的关系，为胃癌的治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2005年3月～2011年12月我院临床和病理资料完整的胃癌标本56例，全部病例术前从未行过放疗、化疗，术后经病理检查确诊。其中男性38例，女性18例，年龄37～79岁，平均62.1岁。肿块直径≥2.5 cm者40例，<2.5 cm者16例。临床和病理上证实有区域淋巴结转移36例，无淋巴结转移20例。高分化胃癌20例，中分化胃癌17例，低分化胃癌19例。浸润深度：T1期6例，T2期11例，T3期36例，T4期3例。TNM分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期15例，Ⅲ期25例，Ⅳ期6例。另取正常胃黏膜组织15例作为对照组，标本取自胃十二指肠溃疡手术标本中正常的胃黏膜组织，并经病理证实且排除重度不典型增生。全部标本经10%福尔马林液固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，1张用于HE染色，其余用于免疫组化备用。

1.2 SP免疫组化法检测Tiam1蛋白表达

将腊块切片HE染色，确定标本组织分化程度。采用链霉素-生物素(SP法)免疫组织化学技术。浓缩型兔抗人Tiam1多克隆抗体购自Santa Cruz生物公司，操作严格按照说明书进行。用已知阳性标本做阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.3 免疫组化判定标准

以检测细胞出现棕黄色颗粒为阳性细胞。根据免疫阳性细胞染色程度(A)：无染色为0分；细胞膜或质内见淡黄色颗粒，明显高于背景为1分；较多棕黄色颗粒为2分；大量棕黄色颗粒为3分。每片随机观察5个视野，计数500个细胞中染色阳性细胞数(B)：阳性细胞数<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，>50%为3分。A与B相乘为其最后得分，0～1为阴性(-)，2～3为阳性(+)，4分及4分以上为强阳性(++)。……