STAT3对非小细胞肺癌诊断价值的探讨
2012-01-08宋本艳王鸿程辛彩霞
宋本艳 蓝 秀 王鸿程 辛彩霞 王 超
STAT3是近期研究较多的一类关键性的核转录因子,STAT3信号通路与细胞增殖、分化、凋亡密切相关,该通路异常激活可导致细胞异常增殖和恶性转化[1]。研究发现,STAT3在NSCLC组织中呈异常高表达,我们前期研究[2]也证实了此结果。但目前有关STAT3与血液相关的研究较少,尚未见文献报道STAT3在肺癌患者血液中的表达情况。故本文对40例NSCLC患者、40例肺良性疾病患者、40例正常人进行外周血STAT3 mRNA、血清STAT3蛋白检测,并将资料进行分析,探讨STAT3作为潜在肿瘤标志物对NSCLC的诊断价值。
1 材料与方法
1.1 主要试剂
总RNA提取试剂盒购自北京TIANGEN公司;RT Buffer 、dNTP Mixture、Super-RI 、RT-Enhancer 、Oligo(dT)18 、ReverTra Ace等均购自成都博瑞克生物公司;Taq酶、dNTP等购自大连宝生物公司;PCR引物购自上海生工生物公司;人STAT3、CEA、CA125、CYFRA21-1酶联免疫分析试剂盒购自美国RD公司。
1.2 临床资料
病例均来源于泸州医学院附属医院,肺癌组40例,中位年龄54岁;经组织学检查证实均为NSCLC;鳞癌22例,腺癌18例;高分化13例,中分化17例,低分化10例;有淋巴结转移者23例,无淋巴结转移者17例,均未接受过化疗、放疗、生物治疗等特殊治疗,既往无其它恶性肿瘤病史。肺良性疾病组40例,包括肺炎、慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张等,中位年龄为55岁,上述病例均经临床检查确诊并排除肺癌。同时选取40例健康体检者作为正常对照组,中位年龄为51岁。
1.3 STAT3表达的检测
1.3.1 Real time PCR RNA的提取及cDNA的合成:从肺癌组、肺良性疾病组、正常对照组中,按随机化原则分别选取10例,空腹抽取外周静脉血4 ml,注入EDTA抗凝管,立即提取总RNA,微量核酸定量仪测量OD260/OD280(R)值,R值为1.8~2.0者进行反转录。……
