乳腺癌患者外周血淋巴细胞中CD44表达的临床意义

2012-01-08郝慧婷彭士云

实用癌症杂志 2012年2期

郝慧婷彭士云赵婷

近年研究发现，CD44可帮助癌细胞锚定到细胞外基质，促进肿瘤细胞脱离原发灶向远处转移[1]。本研究应用流式细胞术(FCM)，检测了2010年3月～2010年5月我院收治的、30例乳腺癌患者外周血淋巴细胞中CD44表达水平，并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

对照组为正常健康体检者30名，年龄25～70岁，平均年龄40.7岁。乳腺良性疾病患者30例，年龄25～67岁，平均年龄41.4岁。乳腺癌患者30例，年龄32～72岁，平均年龄52.2岁；均行乳腺癌切除术并经病理检查证实，浸润性乳腺癌24例，非浸润性乳腺癌6例；有淋巴结转移者5例，无淋巴结转移者25例。

1.2 标本采集

乳腺癌和乳腺良性疾病患者于术前1天、正常健康体检者于体检时，抽取外周静脉血2 ml(EDTA抗凝)并送检。

1.3 试剂和方法

异硫氰酸(FITC)荧光素标记的鼠抗人CD44单克隆抗体、异硫氰酸(FITC)荧光素标记的鼠抗人同型对照抗体、FACS溶血素均为美国BD公司产品。取抗凝静脉血2 ml，混匀后分别取100 μl，加入2个12 mm×75 mm流式细胞仪专用FALCON管中，一试管中先加入20 μl CD44-FITC单克隆抗体，轻轻混匀，室温避光孵育20 min后，加入2 ml溶血素，充分混匀，再室温避光静置10～30 min，直至血标本透亮，肉眼看不到红细胞碎片，离心5 min，弃去上清液。然后加入2 ml PBS震荡混匀，再次离心5 min，并弃去上清液，加入0.5 ml PBS。另一试管为阴性对照，加入20 μl FITC Mouse IgG2bκ同型对照，其余步骤同前。流式细胞仪为美国BD公司产品，FACS Canto Ⅱ型。上机检测，收集 2 000个以上细胞，荧光强度以对数放大，结果以CD44阳性细胞率及荧光强度的几何均数(FMI)表示。