CXCR7/CXCL12与乳腺癌淋巴结转移的关系
2012-01-08赵凤辉王金穗刘凤磊郭应芳
赵凤辉 王金穗 刘凤磊 蔡 玮 张 敏 郭应芳
恶性肿瘤的转移机制一直是癌症诊治研究领域中的重要课题。在乳腺癌肿瘤细胞中,趋化因子与受体的结合可激活并介导下游一系列效应分子的活化, 对肿瘤细胞的增殖和侵袭转移能力具有重要的影响,从而增加了肿瘤的恶性程度。新发现的趋化因子受体CXCR7 可与CXCL12结合发挥生物学作用,从而改变了CXCL12 只能与CXCR4 受体结合这一传统观点[1,2]。CXCR7 作为CXCL12 新的受体,亦可能在肿瘤侵袭、转移中发挥重要作用。鉴于此,本研究通过检测不同类型乳腺癌组织中CXCR7 与CXCL12 的表达情况,观察CXCR7 /CXCL12 反应轴对乳腺癌转移的影响,初步探讨其意义,为进一步的研究提供理论支持及实验依据。
1 材料与方法
1.1 临床资料
收集甘肃省人民医院2003年1月1日至2006年1月1日手术切除乳腺癌标本102例,于肿瘤切除15~20 min 内取乳腺癌组织(T)、远癌( 距肿瘤边缘>2 cm)、正常乳腺组织(N)以及腋窝转移淋巴结组织(L),作为实验组及对照组,立即置于液氮中保存。肿瘤分期按照国际抗癌联盟(UICC)TNM分期标准。病例均为女性,手术前未经任何放化疗,年龄34~72岁,平均年龄43.5岁,中位年龄46岁,其中Ⅰ级15例,Ⅱ级63例,Ⅲ级24例,淋巴结转移者48例,无淋巴结转移者54例。
1.2 试剂
Western blot 中所用PVDF 膜购自Millipore 公司,显影用胶片购自柯达公司。所有抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。预染标准分子量蛋白购自GIBCO/BRL公司。ECL 化学发光试剂盒来自Amersham 公司。浓缩蛋白分析液来自Bio-Rad 公司。其他试剂均为分子生物学纯度( 购自Sigma 公司) 。
1.3 方法
从液氮中取出组织,在EP管中将组织剪碎,加入胞质蛋白抽提剂后冰浴中电动匀浆,4℃、12 000 g离心10 min,取上清。采……
