芳香化酶抑制剂对卵巢癌组织块体外培养活性的影响
2012-01-08苏亦平
实用癌症杂志 2012年2期
周 璘 苏亦平
卵巢癌是女性生殖器官常见恶性肿瘤之一,死亡率居妇科恶性肿瘤之首。近年来,关于芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitors,AIs )治疗卵巢癌的临床研究陆续见于报道。本研究初步建立了卵巢癌组织块体外培养模型,应用Histoculture Drug Response Assay (HDRA)技术,对AI的抗肿瘤效应进行初步的探讨,并结合卵巢癌组织中芳香化酶及雌孕激素受体的表达,为进一步阐明芳香化酶抑制剂对卵巢癌的治疗机制奠定基础。
1 材料与方法
1.1 一般资料
收集2009年1月至2010年12月本院因卵巢浆液性囊腺癌手术的临床标本7例,均经术后病理检查确诊。年龄45~72岁,平均年龄53岁。临床分期参照2000年FIGO卵巢癌分期标准。
1.2 卵巢癌组织块体外培养
手术切取肿瘤标本,生理盐水冲洗2次,置于含有培养基的无菌标本瓶中并尽快送检(切除4 h内)。整个过程要求无菌;肿瘤组织先用培养液冲洗2次,置于含有链霉素(100万U加5 ml蒸馏水溶解)和青霉素(80万U加蒸馏水4 ml溶解)各500 μl的培养液中(培养液应变成淡黄色)10 min;培养液冲洗取新鲜卵巢癌组置于24孔培养板中,每培养孔中放置大约1 cm2胶原海绵,每孔加培养液1 ml,液面刚至胶原海绵上方但不覆盖胶原海绵。卵巢癌标本切成直径为0.5~ 1 mm3的组织块置于胶原海绵上,每孔4~6块。培养7 d后,MTT再培养4 h,将组织块转移至另一24孔培养板中,二甲亚砜萃取甲基MTT,萃取液转移至96孔板中,540 nm波长测定吸光度,测定残留组织块重量,计算每克肿瘤吸光度。
1.3 免疫组织化学方法
将上述7例卵巢癌的石蜡标本4 μm厚连续切片,用二甲苯脱蜡并乙醇透明,PBS冲洗。……
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