大蒜素联合替加氟对人HepG2肝癌细胞增殖的影响

2012-01-07王若天邝健辉

中国生化药物杂志 2012年4期

关键词：肝癌

王若天，邝健辉

(1.琼海市人民医院，海南琼海 571400;2.中山大学附属第五医院，广东珠海 519000)

大蒜素是大蒜的主要活性成分，其化学结构为三硫二丙烯，具有广谱的抗菌、抗病毒、降血压、降血脂的作用。近年来发现其还有抗癌作用［1］。5-氟尿嘧啶(5-Fu)虽已应用于肝癌的治疗，但因易产生耐药而大大降低了抗癌有效性。替加氟是5-Fu的衍生物，其化疗指数为5-Fu的2倍，而毒性仅为5-Fu的1/4～1/7。本研究观察大蒜素联合替加氟对人HepG2肝癌细胞增殖的影响，为临床肝癌治疗的联合用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

人肝癌HepG2细胞，中科院上海细胞库;大蒜素(纯度:99.5%)，上海禾丰制药公司;替加氟注射液(5 mL∶0.2 g)，山东齐鲁制药有限公司;DMEM培养基，GIBCO公司;新生小牛血清，上海科兴生物科技有限公司;四甲基偶氮唑盐(MTT)，Sigma公司。

Sunrise酶标仪，奥地利TECAN公司;800B型低速离心机，上海安亭科技仪器厂。

1.2 细胞培养及分组

培养人肝癌细胞株HepG2细胞，培养条件:含10%小牛血清、100 u/mL青霉素、100 mg/mL链霉素的DMEM培养基，置于37℃、5%CO2培养箱待细胞呈单层生长，待培养瓶铺满75%时传代，取对数生长期细胞用于实验［2］。细胞以1×104/mL接种于96孔板，每孔100 μL，培养过夜后随机分为4组。对照组、大蒜素组(50 μg/L)、替加氟组(5 μg/mL)和联合组(50 μg/L 大蒜素 +5 μg/mL 替加氟)，每组6复孔。每组设2个时间点，分别观察24和48 h时，各组细胞增殖情况。