王 堃，王延亮，卢育新，丁小军，程晓晨，张庆林

(1.安徽医科大学 研究生院，安徽 合肥 230032;2.北京放射与辐射医学研究所，北京 100850)

埃博霉素(Epothilone)是黏细菌纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)代谢产生的一类十六元大环内酯类化合物，具有与紫杉烷类化合物相似的稳定微管的作用机理［1］，但其抗肿瘤谱更广，对多药耐药性细胞(包括耐紫杉醇类的细胞)具有明显的细胞毒活性［2］。目前，已有埃博霉素同系物已经被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗对紫杉醇耐药的乳腺癌［3］。埃博霉素 B(Epothilone B，Epo B)通过诱导微管蛋白聚合抑制其解聚，稳定微管结构，阻碍纺缍丝的形成，从而抑制肿瘤细胞的生长［4］。

超高效液相色谱(UPLC)技术是近年发展起来的分离技术，已成为天然药物中活性成分的快速分离和鉴定的有力手段［5］。UPLC具有超高压、超高灵敏度、超高分离度等特点［6］。飞行时间串联质谱仪(Q-TOF/MS)的显著特点是高灵敏度、高选择性，能得到高质量质谱图和化合物精确分子质量［7］。UPLC与Q-TOF/MS联用技术(UPLC/Q-TOF/MS)是目前分析复杂系统的有效方法［8］。

目前，Epo B主要时通过微生物发酵的方法来获得。在以前的研究中我们建立了Epo B高效液相色谱(HPLC)分析方法［9］。UPLC-MS/MS较 HPLC分析时间短，样品用量小，溶剂的消耗少，提高了灵敏度和分离效率。本文在前期研究的基础上，用UPLC-MS/MS对Epo B纯化产品及发酵液提取物进行分析，为Epo B纯化产品的质量控制，发酵液中Epo B的产量及高产菌株的筛选研究奠定了基础。

1 材料

Epo B对照品、Epo A对照品、Epo B纯化产品、发酵液提取物，自制;甲醇(色谱纯)，美国Fisher公司;甲酸(分析纯)，国药集团化学试剂有限公司;超纯水经Millipore纯水系统纯化。……