板栗中蛋白质的分离鉴定及活性研究
2012-01-07张太平张鹤云
李 艳，张太平，张鹤云
(南京大学 生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室，江苏 南京 210093)
板栗(Castanea mollissima Blume)又名大栗(《浙江天目山药用植物志》)栗果(《滇南本草》)、栗实(《新修本草》)等［1］。具有一定的保健功能，本草纲目称栗果有“补肾益气，治腰，脚无力;内寒腹泄;活血化淤”等功效［2］，中医上又把栗子称为“肾之果”。迄今为止国内外对板栗的研究多在化学成分的鉴定上，对其药理作用的研究少之又少，尤其是蛋白质的研究还未见报道。本实验对板栗中蛋白质的活性进行了研究，为板栗"补肾"提供科学数据，为板栗的深度开发利用提供参考。
1 材料
板栗，由河北省兴隆县提供。
DMEM(批号:NVH0303)，赛默飞世尔生物化学制品(北京)有限公司;胰蛋白酶(批号:24301316)，AMRESCO;四甲基偶氮唑盐(MTT)，南京大冶生物科技有限公司;胎牛血清(FBS，批号:8131652)，GIBCO;促肝细胞生长因子(HGF，批号:20100401)，广东省药物研究所制药厂;寡聚原花色素(OPC)，本实验室自山楂中提取。
肝癌细胞HepS细胞株由中科院上海药物研究所提供，江苏省肿瘤研究所培养传代，本实验室冻存;小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞为本实验室冻存。
清洁级昆明种小鼠，雌性，22～35 g，购于南京医科大学实验动物中心，合格证号:SCXK(苏)2008-0004。
KQ-250DE型数控超生波清洗器，昆山市超声仪器有限公司;UV-9100型紫外可见近红外分光光度计，北京瑞利分析仪器公司;DG5033A酶联免疫检测仪，南京华东电子集团医疗装备有限公司生产;CO2培养箱，Thermo Forma公司;DY-1001S型电泳仪，南京大学仪器厂;JD801凝胶电泳图像分析仪，南京捷达公司。
