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肝癌胃癌组织中端粒酶活性的检测及其与癌组织病理类型关系的研究

2012-01-03延长油田股份有限公司青化砭采油厂卫生所延安716000杨东梅

陕西医学杂志 2012年7期
关键词:肝癌胃癌

延长油田股份有限公司青化砭采油厂卫生所(延安716000) 杨东梅

端粒酶(Telomerase)是一种核糖核蛋白酶,能以自身RNA为模板,逆转录合成端粒DNA,以维持端粒的一定长度,端粒的一定长度是维持细胞正常分裂及其寿命所必需的[1]。正常机体细胞除生殖细胞和干细胞外,均测不到端粒酶活性。近年来的研究发现,多种人类恶性肿瘤组织端粒酶活性显著升高,端粒酶活化与恶性肿瘤的发生发展密切相关[1]。本文用端粒酶PCR-ELISA法对不同病理类型的肝癌和胃癌组织标本进行了端粒酶活性检测与研究,旨在探讨端粒酶在肝癌和胃癌组织中的表达情况及其与肿瘤病理类型的关系,并为肝癌和胃癌诊断提供一种分子标记物。

材料与方法

1 肝癌和胃癌标本分型与处理 肝癌标本分为四型:块状型(单个或多个融合癌块直径>5cm);结节型(癌结节数目不等,直径介于3~5cm);小肝癌(孤立的直径<3cm的癌结节,或相邻两个癌结节直径之和<3cm);弥散型(癌组织呈弥散分布无明显结节或呈米粒至黄豆大小49篇结节散布于全肝)。胃癌标本分为五型:乳头状腺癌,管状腺癌,低分化腺癌,印戒细胞癌,未分化癌。所有标本均经病理检查确诊。标本采集后立即置于液氮中,然后移到-80℃低温冰箱中保存。端粒酶提取与检测的全套试剂为德国Boehringer Manheim公司产品。

2 端粒酶提取与活性检测 用端粒酶PCRELISA法对肝癌和胃癌标本及非癌肝胃组织标本进行端粒酶活性检测。操作方法简述如下:各组织标本50mg在200μl预冷的裂解液中匀浆化,置碎冰中作用30min,在4℃下20000r/min离心20min,取上清液保存于-80℃备用。……

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