高永鹏， 林 晨△， 田红霞， 陈 琛， 秦雅楠， 周羽竝， 李扬秋

(暨南大学医学院1 微生物与免疫学系， 2生物化学系，3血液病研究所， 广东 广州 510632)

BCR-ABL-SEA DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的免疫应答*

高永鹏1， 林 晨1△， 田红霞1， 陈 琛1， 秦雅楠1， 周羽竝2， 李扬秋3

(暨南大学医学院1微生物与免疫学系，2生物化学系，3血液病研究所， 广东 广州 510632)

目的了解BCR-ABL-SEA双表达DNA疫苗诱导BALB/c小鼠特异性细胞和体液免疫应答效应。方法用已成功构建的重组双表达BCR-ABL 多肽和 SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES-SEA (B-P-S)免疫小鼠，间隔14 d共3次。相同方法用单表达BCR-ABL 多肽或 SEA多肽的质粒BCR-ABL-pIRES 和SEA-pIRES免疫小鼠作对照。利用CCK-8 比色法检测小鼠脾脏T 细胞对K562细胞株的杀伤活性；流式细胞术测定小鼠脾脏CD4+与CD8+T细胞表达情况；ELISA法检测小鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)生成情况；间接免疫荧光法检测血清中抗BCR-ABL抗体。结果免疫后第7周时，双表达重组质粒B-P-S组小鼠脾脏CTL细胞针对K562杀伤率、血清中INF-γ含量均明显高于单表达BCR-ABL-pIRES组和SEA-pIRES组(P<0.05)；CD4+/CD8+T细胞比值、血清中IL-4含量各组之间无明显差异(P>0.05)；荧光显微镜检测到血清中有抗BCR-ABL抗体。结论所构建的BCR-ABL-SEA重组双表达质粒可诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答效应。

白血病； 基因,BCR-ABL融合； 葡萄球菌肠毒素A； 疫苗,DNA

微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)仍然是慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)治疗缓解后复发的一个重要因素,特异性免疫治疗通过免疫监测和清除残留白血病细胞对预防CML复发以及延长生存期有重要作用[1,2]。CML患者具有特征性的BCR-ABL融合基因，研究发现表达BCR-ABL融合基因的细胞及其融合蛋白多肽可以诱导T细胞克隆性增殖，由于单独BCR-ABL多肽免疫原性较弱[3]，因此寻找适合的免疫佐剂是临床应用亟待解决的重大问题。……