刘启才， 王颖峰， 杨春祥， 李晓艳, 彭 燕, 彭 杰, 李 冰， 李 立

(1广州医学院实验医学研究中心， 广东 广州 510182； 2荆门市第二人民医院神经内科， 湖北 荆门 448000；3中山大学附属第一医院肾内科，4华南肿瘤学国家重点实验室，中山大学肿瘤防治中心影像介入科， 广东 广州 510060)

siRNA沉默LBH基因促进人支气管上皮细胞周期进展*

刘启才1△， 王颖峰1， 杨春祥2， 李晓艳3, 彭 燕1, 彭 杰1, 李 冰1， 李 立4△

(1广州医学院实验医学研究中心， 广东 广州 510182；2荆门市第二人民医院神经内科， 湖北 荆门 448000；3中山大学附属第一医院肾内科，4华南肿瘤学国家重点实验室，中山大学肿瘤防治中心影像介入科， 广东 广州 510060)

目的利用合成的小分子干扰RNA(siRNA)转染人支气管上皮细胞16HBE，观察LBH(limb-bud and heart) 基因表达下调对16HBE细胞周期及相关基因表达的影响。方法脂质体2000转染靶向LBH基因的siRNA到16HBE细胞，荧光定量RT-PCR检测siRNA转染后LBH基因表达，流式细胞术检测LBH基因沉默后16HBE 细胞周期的改变，荧光定量RT-PCR及Western blotting检测LBH基因沉默后细胞周期素E1和E2表达水平。结果50 nmol/L siRNA转染16HBE细胞48 h后,LBH基因的表达水平只有对照组的14%；siRNA转染16HBE细胞48 h，其G1期细胞百分率比对照组减少9.28%，而S期细胞百分比增加14.08%；16HBE细胞在50 nmol/L siRNA的转染后，细胞周期素E2的表达水平为对照组的2倍，而细胞周期素E1的表达没有发生明显改变。结论靶向于LBH基因的siRNA能有效沉默16HBE细胞中LBH基因的表达，LBH基因的表达下调促进了16HBE细胞周期G1/S期的进展；细胞周期素E2的表达上调参与了LBH沉默导致的细胞周期G1/S期的进展。

RNA干扰； 基因,LBH； 16HBE细胞； 细胞周期

应用抑制性消减杂交获得……