韦 喆, 张金明, 安 庚, 冀晨阳, 潘淑娟

(中山大学孙逸仙纪念医院整形外科, 广东 广州 510120)

小鼠肌源性干细胞高表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin*

韦 喆, 张金明△, 安 庚, 冀晨阳, 潘淑娟

(中山大学孙逸仙纪念医院整形外科, 广东 广州 510120)

目的探讨小鼠肌源性干细胞(MDSCs)的生物学特性和表型。方法取小鼠骨骼肌,用酶分步消化，应用差速贴壁法进行纯化获取MDSCs，观察细胞的形态，对MDSCs分别进行增殖能力、克隆形成率和融合情况等鉴定；通过流式细胞术、免疫荧光法及免疫印迹法(Western blotting)等检测初步确定细胞表型。结果经差速贴壁法获取的MDSCs为圆形或短梭形细胞,聚集成簇，呈对数生长；细胞倍增时间(9.69±2.08)h,克隆形成率(13.35±2.54)%；细胞在高汇合度(>50%)或低血清(2%FBS)培养时，极易融合成肌管或肌细胞链；流式细胞术和免疫荧光技术鉴定：CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin在原代MDSCs中的表达均>90%；Western blotting检测显示随着细胞的纯化, desmin表达越来越强，α-SMA表达越来越弱。结论MDSCs通过差速贴壁法获取时纯度较高，它具有高水平表达CD34、Sca-1、Bcl一2和desmin的生物学特性，这4种蛋白可作为鉴定MDSCs的标志物。MDSCs增殖旺盛，可在体外大量扩增，是组织工程研究的一种新型种子细胞。

肌源性干细胞; Preplate技术; 细胞表型; CD34; 干细胞抗原1; 蛋白质Bcl-2; 结蛋白

肌源性干细胞(muscle-derived stem cells, MDSCs)作为一种成体干细胞，具有强大的增殖能力和多项分化潜能，并具有免疫赦免性[1],现已成为研究热点。与骨髓间充质干细胞[2]相比，MDSCs取材方便，来源广泛，对再生障碍性贫血或骨髓源性肿瘤等疾病的应用不受限制，在Duchenne肌营养不良、心肌缺血和肌肉缺损修复上取得了明显的效果[3,4]，是组织工程研究的一种新型种子细胞。但是……