叶 盛， 张怀勤， 林以诺， 黄伟剑， 张艳丽， 邵小琳

(温州医学院附属第一医院心内科, 心血管生物和基因研究所，浙江 温州 325000)

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体参与雷帕霉素诱导血管内皮细胞功能损伤的体外研究*

叶 盛， 张怀勤△， 林以诺， 黄伟剑， 张艳丽， 邵小琳

(温州医学院附属第一医院心内科, 心血管生物和基因研究所，浙江 温州 325000)

目的探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响，以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法用浓度为0、1、10、100 μg/L 的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h，应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力，Transwell小室和划痕试验检测细胞迁移能力，DAPI染色观察凋亡细胞核形态改变，Western blotting法检测caspase-3活性以显示血管内皮细胞的凋亡，并用 Western blotting检测TRAIL在凋亡的内皮细胞中的表达。结果雷帕霉素(1-100 μg/L)能诱导血管内皮细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.01)。除雷帕霉素1 μg/L外， 10 μg/L和100 μg/L雷帕霉素均能抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01)，同时雷帕霉素(10-100 μg/L)使TRAIL蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性(P<0.01)。结论雷帕霉素能诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖和迁移能力。TRAIL表达上调与雷帕霉素诱导血管内皮细胞损伤有一定的相关性。

雷帕霉素; 内皮细胞; 细胞凋亡; 细胞增殖; 细胞迁移; 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体

冠心病是危害人民健康的主要疾病之一，近年来经皮腔内冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI) 广泛用于冠心病的非药物治疗，为冠心病患者带来极大的获益。但是支架的植入又带来两大棘手的问题。首先是支架内血栓的形成。早期血栓问题已通过长期服用双联抗血小板药物基本得到了解决。其次是支架内再狭窄。由于PCI过程中球囊扩张及支架作为外源性异物的植入对血管内皮的刺激，患者的冠脉往往出现内膜过度增生而导致支架再狭窄。……