α-硫辛酸对急性坏死性胰腺炎合并肺损伤的保护作用
2011-11-22孙楹杨淑丽叶建新祝建红陈卫昌
孙楹 杨淑丽 叶建新 祝建红 陈卫昌
·短篇论著·
α-硫辛酸对急性坏死性胰腺炎合并肺损伤的保护作用
孙楹 杨淑丽 叶建新 祝建红 陈卫昌
重症急性胰腺炎(SAP)并发肺损伤的病理机制尚未完全阐明。目前研究认为核因子κB(NF-κB)在SAP发病过程中扮演重要角色[1]。α-硫辛酸(α-lipoic acid, ALA)属于维生素B的一类化合物,是已知抗氧化剂中作用比较广泛的一种,具有抑制NF-κB的作用,在改善人的体质、抗氧化,治疗糖尿病并发症和其他多种疾病方面备受关注[2]。本实验应用ALA干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠,观察其对ANP并发肺损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制。
一、材料和方法
1.材料:健康Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,清洁级,体重200~250 g,由苏州大学医学院实验动物中心提供。牛磺胆酸钠(95% )、α-硫辛酸购自美国Sigma公司,TNF-α、ICAM-1试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司,髓过氧化物酶(myelopercxidase,MPO)试剂盒购自南京建成生物工程研究所,兔抗鼠NF-κB p65多克隆抗体购自美国Bioworld公司。
2.实验分组及模型制备:54只SD大鼠按完全随机法分为对照组、ANP组和ALA组,各18只。参照Aho等[3]的方法,采用胰胆管逆行注入5%牛磺胆酸钠(0.1 ml/l00 g体重,0.1 ml/min)制备ANP大鼠模型。ALA组在ANP造模前1 h腹腔内注射ALA(0.1 g/kg体重)。对照组开腹后仅翻动胰腺即关腹。术后3、6、12 h分批经左心室抽血,离心分离血清。将大鼠处死,分别取肺、胰腺组织,部分用10%甲醛固定,部分液氮保存。
3.观察指标和检测方法:固定的肺、胰腺组织经石蜡包埋、切片,光镜下观察组织病理学改变。应用常规免疫组化法检测肺组织NF-κB表达。每组选取5张切片,每张切片选取5个高倍视野,计数阳性细胞数。……
