周国雄 朱陈 丁晓凌 张海峰 张弘 曹维 强晖 徐正府

·论著·

MK886和Celecoxib抑制胰腺癌SW1990细胞生长及血管生成的实验研究

周国雄 朱陈 丁晓凌 张海峰 张弘 曹维 强晖 徐正府

目的观察5-脂氧合酶拮抗剂MK886、环氧化酶2拮抗剂Celecoxib干预SW1990细胞后对细胞增殖及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法应用不同浓度的MK886、Celecoxib以及两者联合处理SW1990细胞，采用胆囊收缩素(CCK-8)法检测细胞的增殖， RT-PCR法检测细胞白三烯B4受体1 (BLT1)mRNA、前列腺素2(PGE2) mRNA、VEGF mRNA的表达。结果10 μmol/L MK886或20 mmol/L Celecoxib处理24 h后，SW1990细胞的增殖受到明显抑制(1.80±0.06比1.65±0.10；2.04±0.03比1.86±0.02，P<0.05)，且随药物浓度的增加，细胞的增殖抑制更明显。两拮抗剂联合干预12 h后，SW1990细胞的增殖即受到非常明显的抑制(1.72±0.05比1.52±0.05，P<0.01)。Celecoxib处理细胞48 h后，细胞BLT1、VEGF mRNA表达与对照组比较无明显变化，但PGE2 mRNA的表达明显减少(37.50比71.50，P<0.05)；MK886或MK886+Celecoxib联合处理细胞后，细胞BLT1、VEGF mRNA表达明显减少(40.30、22.75比126.50，P<0.05)，而PGE2 mRNA的表达与对照组比较无明显变化。结论花生四烯酸的两条代谢途径均与胰腺癌的发生及增殖有密切关系，同时抑制两条途径可显著抑制胰腺癌细胞的增殖。

胰腺肿瘤； MK886； Celecoxib； 5-脂氧合酶； 环氧化酶-2

研究显示，花生四烯酸代谢途径与肿瘤的发生、发展有密切关系。花生四烯酸的代谢有两条途径，即环氧化酶(COX)和脂氧合酶(LOX)代谢途径。COX代谢途径的下游产物是前列腺素2(prostaglandin E2,PGE2)，LOX催化的代谢终产物为白三烯(leukotrienes, LTs)。Celecoxib是COX2拮抗剂，MK886是特异性5-LOX拮抗剂。5-LOX还可影响血管内皮生长因子，促进肿瘤血管生成。本研究应用MK886和Celecoxib干预人胰腺癌细胞株SW1990，观察其对癌细胞生长及VEGF mRNA表达的影响，探讨抑制胰腺癌细胞增殖更有效的途径。

材料与方法

一、细胞培养

胰腺癌细胞株SW1990购自中国科学院上海生命科学研究所，用含10%新生小牛血清的DMEM培养液常规培养， 3～4 d用胰酶消化，按1∶3传代。

二、细胞增殖检测

采用胆囊收缩素(CCK-8)法。取对数生长期细胞，以1×104个细胞(100 μl)接种于96孔板培养过夜。加入终浓度为10、20、40、80、100、200 μmol/L的MK886(Bimol公司)或10、20、40、80、100 μmol/L的Celecoxib(上海信合化工有限公司)或200 μmol/L MK886+80 μmol/L Celecoxib继续培养6、12、24、48 h。每个剂量组设三个复孔。对照组加含0.01% DMSO培养液。培养后每孔加入CCK-8 10 μl，继续培养2 h。酶标仪测定各孔450 nm处吸光值(A450)。……