冯柏康，李其凤，李卫民，肖 飞（广州中医药大学，广州市 510405）

灵芝孢子油是以灵芝Ganoderma lucidum（Leysds.Fr.）Karst.在生长成熟期产生的孢子为原料，采用超临界CO2技术获得的提取物。现代药理研究证明，灵芝孢子油具有多种生物活性。目前，在已上市的灵芝孢子油中，多以灵芝总三萜作为产品的功效性成分，大部分厂家在测定该成分时采用的是分光光度法。在试验应用中，笔者发现这种方法的专属性、稳定性及重复性均较差，测定结果难以准确反映灵芝孢子油中三萜类成分的含量。同时，灵芝孢子油中是否含有灵芝三萜在学术界仍存在一定的争议，灵芝孢子油的质量控制标准仍需进一步深入研究。鉴于此，笔者采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法，按照《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》[1]，对灵芝孢子油进行分析，建立灵芝孢子油HPLC指纹图谱[2]，尝试为灵芝孢子油的质量控制提供一种新思路；并采用系统聚类法[3，4]对样品的指纹图谱进行分析，考察不同采收时间、产地及破壁工艺对灵芝孢子油质量的影响。

1 仪器与试药

2695型HPLC仪、2420型蒸发光散射检测器、WATERS EMPOWER色谱工作站（美国Waters公司）。

甲醇、异丙醇为色谱纯；甘油三油酸酯对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111692-200901）；样品由广州中医药大学首席教授徐鸿华提供并鉴定，为灵芝菌科灵芝G.lucidum（Leysds.Fr.）Karst.破壁孢子的超临界CO2提取物，根据其产地、采收时间、破壁工艺的差异按表1进行编号（由于涉及到商业秘密，样品的3个产地分别以字母开头的L、P、J代替，破壁工艺则以数字1和2代替）。……