蒲小平，杨海麟，周楠迪*

(江南大学生物工程学院，工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122)

基于生物条形码探针和金纳米颗粒的大肠杆菌O157:H7检测

蒲小平，杨海麟，周楠迪*

(江南大学生物工程学院，工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122)

建立一种基于生物条形码探针和金纳米颗粒(gold nanoparticles，AuNPs)对致病性大肠杆菌O157:H7检测的新方法。用生物功能化的磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles，MNPs)和AuNPs与目标物大肠杆菌O157:H7进行免疫反应，形成MNPs/目标物/AuNPs“三明治”式复合体。利用去杂交将AuNPs上标记的条形码DNA释放出来，通过DNA探针杂交条形码DNA引起AuNPs颜色变化来确定大肠杆菌O157:H7的存在，这种颜色变化很容易用裸眼观察到并且可以通过紫外-可见吸收光谱定量分析，该方法在纯样品和牛奶中最低检测限为102CFU/mL，检测范围为102～106CFU/mL。应用基于生物条形码探针和AuNPs对大肠杆菌O157:H7检测具有准确、快速、操作简单的优点，为食品安全监测提供了新的方法。

磁性纳米颗粒；金纳米颗粒；生物条形码；紫外-可见分光光度法；大肠杆菌O157:H7

大肠杆菌O157:H7(E. coli O157:H7)是肠出血性大肠杆菌的一个主要菌型，自1982年在美国首次被分离并确认为食物中毒新型致病菌以来[1]，此菌在世界范围内发生过多次暴发，并造成严重危害。食用被该菌污染的食物可导致人类腹泻、出血性肠炎，并可继发溶血性尿毒综合征(haemolytic uraemic syndrome，HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP)等严重的并发症[2]。因此，该菌引起了各国食品安全管理机构的高度关注。目前，食品中大肠杆菌O157:H7的检测主要依靠常规的细菌学培养方法、PCR、ELISA，但这些方法存在操作繁琐，检测周期长，并且受样品复杂成分的影响等弊端，极大地限制了在食品行业中对该菌污染的有效监控[3-5]。……