陈传新,石怡珍,杨 仪,唐 军,刘增礼△,徐巧玲

(1.苏州大学附属第二医院核医学科,江苏苏州251004;2.江苏省无锡市第四人民医院核医学科 214062)

1981年McDonald等[1]从猪的胃组织中分离出胃泌素释放肽(gastrin releasing peptide,GRP),并发现GRP存在于原发性肺癌尤其是小细胞肺癌(SCLC)中。1994年Miyake等[2]研究证实胃泌素释放肽前体(pro-gastrin-releasing peptide,ProGRP)在血浆中含量稳定,能代表GRP水平和GRP基因表达。近年来,有关ProGRP的研究十分活跃[3-12]。

本课题组前期对利用基因重组的ProGRP(31-98)作为抗原免疫Balb/c小鼠所制备的单克隆抗体E-B5进行了较为详细的研究[9-10]。现对另一株抗 ProGRP(31-98)单克隆抗体 D-D3的131I标记方法及在健康昆明小鼠体内生物学分布进行了初步研究,报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 抗ProGRP(31-98)单克隆抗体D-D3(5 mg/m L)由中国辐射防护研究院惠赠;Na131I溶液由中国核动力研究院生产;昆明小鼠由苏州大学动物实验中心提供;氯胺-T为Sigma公司产品;Sephadex G50葡聚糖凝胶柱由Pharmacia公司生产;放射性活度仪为美国Capintec公司产品。

1.2 方法

1.2.1 NCI-H 446细胞株中ProGRP表达的检测 收集传代培养的人SCLC NCI-H446细胞,加入0.1%的Triton-X100预孵,然后以D-D3作为一抗,FITC-羊抗鼠单克隆抗体为二抗,用流式细胞仪检测NCI-H446细胞PrGRP的表达。以肺腺癌细胞株A 549作为对照。

1.2.2131I标记 D-D3单抗 采用氯胺-T法用131I标记单克隆抗体D-D3。利用纸层析法测定标记率,支持物为新华1号层析纸,展开剂为生理盐水,131I-D-D3的Rf=1/10,131I的Rf=1。

表1 健康昆明小鼠尾静脉注射131 I-D-D3不同时间点各脏器的百分注射剂量率(±s,%ID/g)

表1 健康昆明小鼠尾静脉注射131 I-D-D3不同时间点各脏器的百分注射剂量率(±s,%ID/g)

器官名称 5 min 15 min 30 min 1 h 2 h 4 h 8 h 12 h 24 h 48 h血液 64.9±10.1 54.3±7.7 34.2±6.6 31.4±8.6 25.6±4.8 24.2±3.7 21.5±3.4 20.3±2.9 17.6±2.3 10.9±2.2心脏 12.4±2.3 9.6±2.5 7.8±2.2 6.8±2.1 6.5±2.4 6.6±1.9 6.4±1.2 5.8±2.1 3.4±1.7 2.8±1.0肝脏 23.1±2.6 20.8±4.4 17.3±4.7 9.4±2.8 9.7±2.8 7.8±2.9 6.4±1.5 6.1±1.6 4.6±1.2 3.8±0.8脾脏 16.5±3.6 12.7±2.8 12.5±2.2 9.7±2.8 9.1±1.8 6.1±1.2 4.9±1.1 3.8±0.9 3.7±1.1 2.8±1.1肺脏 24.8±7.3 23.5±6.5 19.8±4.2 10.7±3.8 9.2±2.2 7.8±2.3 6.4±1.7 5.2±1.3 3.8±1.0 2.6±1.1肾脏 23.9±3.1 21.6±2.7 19.1±2.1 13.9±2.9 12.2±2.6 11.8±2.1 10.3±1.5 8.5±1.7 7.0±1.6 5.7±1.1胃 10.4±2.2 9.2±1.8 8.7±1.9 7.5±1.8 6.8±1.3 6.2±1.5 5.9±1.3 5.1±1.6 4.6±1.4 4.2±1.5肠8.3±2.2 6.7±2.0 6.5±1.5 6.5±1.6 6.1±2.4 5.8±1.9 5.2±1.4 4.8±1.3 4.0±1.4 2.6±0.7骨骼 12.8±2.6 11.7±2.7 9.9±2.4 9.6±2.3 8.3±2.1 7.8±2.3 7.3±2.1 6.6±1.8 5.4±1.4 4.2±1.0肌肉 6.3±1.4 4.8±1.5 3.8±0.9 3.6±0.7 2.9±1.1 2.6±1.1 2.4±0.9 1.6±0.4 1.5±0.6 1.4±0.3脑5.7±1.8 3.6±1.3 3.6±1.2 3.1±0.7 2.6±1.0 2.5±1.1 2.3±0.8 2.3±0.3 1.9±0.5 1.3±0.4

1.2.3131I-D-D3的分离纯……