史美龙 邵 红 鲁海宏 张景斌 (吉林省人民医院普外科，吉林 长春 300)

血管紧张素转移酶(ACE)是肾素-血管紧张素系统中的重要成员之一，其不仅在维持微循环稳态而且在肿瘤发生发展中发挥着重要作用〔1，2〕。ACE基因位于人类第17号染色体长臂2区3带(17q23)，ACE基因第16内含子存在一个287碱基的插入(I)、缺失(D)多态性，该多态性与血清ACE表达水平有关，即缺失型等位基因(D)ACE水平明显增高。以往大量研究调查了ACE基因I/D多态性与多种肿瘤的相关性〔3～7〕，然而，其与中国人群胃癌的相关性尚不清楚。为此，本研究采用PCR技术检测了中国人群胃癌患者的ACE基因I/D多态性，旨在探索其与胃癌的关系，为胃癌的发病机制提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 根据临床症状和组织病理学结果临床确诊为胃癌的我院普外科患者181例，男109例，女72例;平均年龄(56.5±11.2)岁。其中高中分化117例，低分化64例;临床Ⅰ～Ⅱ期104例，临床Ⅲ～Ⅳ期77例;无转移107例，有转移74例。对照组198例选自体检健康人群，男129例，女69例，平均年龄(54.2±10.5)岁，无肿瘤家族史及胃肠道炎症性疾病，研究对象均为非血缘关系汉族个体。

1.2 DNA提取及引物合成 采集研究对象外周静脉血2 ml，采用北京百泰克公司全血基因组DNA提取试剂盒提取DNA。参照文献〔8〕设计引物。上游引物:5'-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3'，下游引物:5'-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3'。引物由上海英骏生物技术有限公司合成。

1.3 PCR法检测 PCR反应体系为10 μl，其中包括基因组DNA 0.8 μl，上、下游引物各 0.1 μl，TaqDNA 聚合酶 0.3 U，10 × 反应缓冲液 1.2 μl，Mg2+0.6 μl，dNTPs 1.2 μl，不足体积用无菌去离子水补充至10 μl。PCR反应循环参数均为:94℃预变性4 min;94℃变性30 s，64 ℃退火90 s，72℃延伸90 s，35个循环。以上反应均在Eppendorf热循环仪完成。……