李耀斌 聂 菁 吕 诚 胡小令 薛国勇 鲁纯纠 (南昌大学医学院解剖学教研室，江西 南昌 330006)

多数学者认为阿尔茨海默病 (AD)与 β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积激活小胶质细胞引起的炎症反应和神经毒性作用有关。激活的小胶质细胞分泌多种炎性介质参与AD病理过程，其中白细胞介素-1β(IL-1β)和前列腺素E2(PGE2)在这一过程起重要作用〔1～3〕。雷公藤内酯醇是雷公藤中的主要有效成分之一，具有显著的抗炎、免疫调节作用，可通过抑制免疫细胞中炎性因子的表达而发挥其药理作用〔4〕。故本实验拟用Aβ1-40诱导体外培养的原代小胶质细胞，建立AD细胞模型，并在此基础上给予不同剂量中药免疫抑制剂雷公藤内酯醇进行干预，观察药物对IL-1β和PGE2表达的影响，探讨雷公藤对AD的可能作用机制，为临床寻找防治AD的有效中药提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 新生24 h SD大鼠，购自江西中医学院实验动物中心。

1.1.2 试剂 DMEM/F12(1∶1)培养基、特优级新生小牛血清、胰蛋白酶均为Invitrogen公司产品;胎牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品;盐酸利多卡因 (10 ml注射液，有效含量0.2 g，分子量288.82);雷公藤内酯醇、Aβ1-40均为Sigma公司产品;小鼠抗CD11b/c抗体 (CBL1512Z克隆号OX-42)为美国Chemicon International公司产品，人P物质(SP)免疫组织化学试剂盒、二氨基联苯胺 (DAB)显色试剂盒和多聚L-赖氨酸为北京中杉公司产品;IL-1β、PGE2放射免疫试剂盒均为北京华英公司产品。

1.2 方法

1.2.1 小胶质细胞纯化培养 按已有的小胶质细胞原代培养方法〔5〕，采取24 h内出生的SD乳鼠无菌条件下开颅取脑，仔细剥离血管和软脑……