王永霞，李道明，李海梅，高冬玲

(1新乡医学院病理学教研室，河南 新乡 453003;2郑州大学第一附属医院;3安阳市肿瘤医院)

核转录因子-κB(NF-κB)是细胞信号转导途径中的关键因子，参与免疫、炎症、肿瘤的发生和发展，细胞增殖和细胞凋亡以及血管生成等多种生理病理过程的基因调控，其主要形式为p50和p65组成的二聚体［1］。目前NF-κB是医学特别是医学肿瘤研究的热点。2005年10月～2007年1月，我们采用原位杂交技术检测了NF-κB p50、p65 mRNA在食管鳞癌组织中的表达，探讨其在食管鳞癌浸润、转移中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 49份食管鳞癌组织标本为郑州大学第一附属医院食管癌手术切除标本存档蜡块。所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。其中男27例，女22例;年龄38～75(60.6±9.5)岁。病理组织学证实均为鳞状细胞癌，其中组织学分级Ⅰ级24例，Ⅱ级16例，Ⅲ级9例;有淋巴结转移23例。浸润深度:浅层组13例，深层组36例。33份癌旁组织及32份切端组织已证实为不典型增生组织和正常食管黏膜组织。

1.2 试剂及方法 采用原位杂交技术:预杂交液、胃蛋白酶和核固红购自武汉博士德公司;SA-AP和BCIP/NBT为北京中杉金桥公司产品;焦碳酸二乙酯(DEPC)为美国Fluka公司产品。探针序列NF-κB p50:5'-CCAGCTGTCCTGTCCATTCT-3'(20 bp);NF-κB p65:5'-CACCATGGTGGGAAACTCATC-3'(21 bp)，由北京奥科公司设计合成，生物素标记。严格按照操作说明书进行。用不加探针的杂交液孵育组织切片做阴性对照。结果判断标准:NF-κB p50、p65 mRNA均以核、质着紫蓝色为阳性。每张切片取10个高倍视野，计算阳性细胞百分数，阳性细胞数＜10%为阴性，≥10%为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件。两样本率的比较采用四格表资料χ2检验;多样本率的比较采用行列表资料的χ2检验。……