张颖 王仙园 周娟

（1.武警北京总队医院，北京100027；2.第三军医大学护理学院，重庆400038）

战备消毒包是战时对伤员开展救治的医疗装备，通常灭菌后备用存放在战备仓库中。超过一定的储存时限，灭菌消毒包内就会培养出细菌。因此，了解消毒包内细菌来源，有利于采取针对性措施，从而确保和延长消毒包的有效储存时限。我们在沿海城市漳州某医院战备仓库对压力蒸汽灭菌战备消毒包的储存时限进行了动态观察，对消毒包首次培养细菌进行分类，鉴定为空气中的优势菌[1]。为进一步探究消毒包内细菌是否来源于空气中细菌，我们进行了实验研究，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

1.1.1 战备消毒包菌株来源 参照《消毒技术规范》对战备消毒包进行清洗、打包、压力蒸汽灭菌[2]，存放在战备仓库的储存箱内，于不同时限点进行取样培养，鉴定消毒包内首次培养的细菌为腊样芽孢杆菌、人葡萄球菌、藤黄微球菌、沃氏葡萄球菌。

1.1.2 战备仓库空气菌株来源 参照《消毒技术规范》“平板暴露法”进行[2]。根据细菌形态、革兰染色镜检、生化试验及VITEK系统对空气细菌进行鉴定，挑选出腊样芽孢杆菌、人葡萄球菌、藤黄微球菌、沃氏葡萄球菌菌株。

1.2 方法

1.2.1 转种、培养、振摇细菌 挑取上述细菌单个菌落，划线转种血平板，37℃ 培养24h；然后将细菌转种至3ml LB培养基中，放置于涡旋振荡器，固定，200r／min，37℃，振荡过夜。

1.2.2 提取基因组DNA 按照Omega基因组DNA提取试剂盒操作说明进行。

1.2.3 测定 DNA浓度 取 DNA溶液2μl，以198μl去离子水稀释，取100μl至比色杯中，调零后测定浓度。……