范 斌， 何志义

脑梗死发病率，致残率高，且近年来呈逐渐上升的趋势。目前除成人卒中急性期溶栓治疗外，其他治疗都局限于支持治疗，不能阻断脑损伤的发生或诱导脑组织的再生。近年来的研究证明骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)作为一种非造血干细胞，具有自我更新、多向分化潜能，在特定的条件下能够向神经细胞分化，分泌多种神经生长因子、保护因子，具有神经保护作用［1］。本实验拟采用骨髓基质细胞治疗大鼠局限性脑缺血，并观察对大鼠细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)的表达影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 清洁级，2月龄，Wistar大鼠45只(由中国医科大学动物部提供)，体重280～300g雌雄不限，随机将大鼠分为正常对照组、盐水对照组、股静脉注射骨髓基质细胞组，每组动物15只，每组又随机分为缺血再灌注3d、7d、14d 3个亚组，每组动物5只。另取1只Wistar大鼠，用于骨髓基质细胞分离培养，在实验过程中对动物的处理符合动物伦理学标准。小鼠抗 BrdU，兔抗大鼠ICAM-1抗体，生物素标记羊抗兔IgG抗体，生物素标记羊抗小鼠抗体(武汉博士德公司);显微照相仪(Olypus BX，51，Japan);图像处理软件包(Metamorph imagin system V4.6，USA)。

1.2 大脑中动脉闭塞(MCAO)模型制作 采用改良Longa栓线法。以10%水合氯醛(3.5ml/kg)腹腔麻醉大鼠，做颈部正中切口，分离左颈总动脉后穿一根4号缝线，继续分离颈内、颈外动脉，结扎颈总、颈外动脉，用动脉夹夹闭颈总动脉远心端，在其动脉夹远端和结扎之间用1ml注射针头将颈总动脉扎一小眼，将事先准备好的鱼线穿人(鱼线为5cm长，在2.0cm处做一标记，尖端用砂纸磨光滑)，松开动脉夹，调整鱼线的角度和方向插入颈内动脉，测量鱼线尾侧距离动脉分叉处的距离，便可知插入的深度(应为1.8～2.0cm)，用缝线将鱼线固定。……