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榄香烯对K562细胞株的体内外抑制作用

2011-08-21庄彦徐希章圣辉俞康

温州医科大学学报 2011年5期
关键词:小鼠

庄彦,徐希,章圣辉,俞康

(温州医学院附属第一医院,浙江 温州 325000,1.血液科;2.医学科学研究所)

榄香烯(elemene)是从姜科植物温郁金(温莪术,curcuma Wenyujin)中提取的半萜烯类化合物,其主要成分是为β-榄香烯(化学名:1-甲基-1-乙烯基-2,4-二异丙基环己烷;分子式:C15H24,分子量:204),是我国自行开发研制的II类非细胞毒性抗肿瘤药[1],由于其抗瘤谱广[2],疗效确切,能够逆转肿瘤多药耐药并具有镇痛[3]、放化疗增敏作用[4],且不良反应轻微,无骨髓抑制,无肝肾损害,因而越来越多的在肿瘤的临床治疗中获得应用。本实验通过榄香烯对慢性粒细胞白血病急性髓系变的K562细胞株体外和体内的抑制作用,探讨其用于髓系白血病治疗的可能性。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂及仪器:K562细胞株由本室保存;榄香烯乳注射液由大连金港制药有限公司提供(0909251);胎牛血清、RPMI1640购自美国GIBCO公司;AnnexinV/PI购自美国invitrogen公司;Cell Counting Kit-8(CCK-8)购自日本同仁化学研究所;DAPI染液购自碧云天生物研究所;FACS Calibur流式细胞仪(美国BD公司);荧光显微镜OLYMPUS BX41;全自动酶标仪ELX400。

1.1.2 实验动物:SPF 级SCID Beige小鼠,6~8周龄,体重为16~20 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2006-0009。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养:K562细胞接种于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中,37 ℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养,每2 d换液1次,取对数生长期细胞进行实验。

1.2.2 细胞生长抑制试验:K562细胞以1.0×104个/孔接种到96孔板中,使用10、20、30、40μg/mL的榄香烯处理,每孔总体积为100μL。各个浓度均设6个复孔,另设空白对照孔和调零孔。在培养箱分别培养24、48、72 h后,各取出1块96孔板,每孔加入CCK-8溶液10μL,混匀后37 ℃培养箱继续孵育3 h,酶标仪450 nm波长测吸光度(A450)。……

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