田克斌，韩丽林，江银华，周国瑜

（1.丽水市人民医院 口腔科，浙江 丽水 323000；2.上海交通大学附属第九人民医院 口腔颌面外科，上海 200011）

光动力治疗和脉冲激光治疗鲜红斑痣要取得好的效果[1-2]，必须对病灶的结构有清楚的了解，才能对治疗参数，比如能量、脉宽等做出相应的选择，达到理论上实现对血管的选择性破坏，周围正常组织得到保护。已有文献报道组织铸型、连续切片等技术进行组织的三维结构重建[3-4]，但鲜红斑痣常常不是由固定知名血管供血，使组织铸型技术难于实际应用，而连续切片耗时又浪费大量劳力，故也难以广泛应用。本研究通过厚切片、免疫荧光染色、利用“显微CT”[5]激光共聚焦显微镜观察，得到鲜红斑痣三维结构分布图像。

1 材料和方法

1.1 材料 选取我科临床、病理诊断为鲜红斑痣病1例的石蜡包块作标本，共5个石蜡块。患者男性，44岁，标本切取部位为面部，未经过治疗，皮损形态突出皮肤表面，暗红色，病灶压迫可褪色（见图1）。主要仪器：LSM 510 ZEISS 上海第二医科大学激光共焦室。主要试剂：鼠抗人anti-cd34（CHEMICON公司），羊抗鼠FITC标记二抗（长岛公司）。

图1 患者标本切取部位（面部）

1.2 方法

1.2.1 载玻片的处理：将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中，浸泡5 min，室温过夜干燥，装盒备用。

1.2.2 厚切片的制备：30μm、10μm厚切片，同时制备4μm切片以便于对比。5个石蜡块的切片数目见表1。

表1 每个石蜡块切片的详细数目

1.2.3 染色：分别予HE常规染色、免疫组化染色、免疫荧光染色，以CD34标记血管内皮细胞，以便观察小血管及与周围组织对照。……