王七生，秦金勇，蒋立立

桂林市疾病预防控制中心检验科，广西桂林 541001

手足口病是肠道病毒引起的急性传染病，具有流行性强、传染性强、传播途径复杂等特点，好发于儿童（5岁以下），手足口病较常见的病原体是柯萨奇病毒A16型（CoxA16）和肠道病毒71型（EV71）[1-2]。近年来该病呈现出了新的特点：①发病高峰期明显提前；②全国高发地区区域扩大，且发病强度高于往年；③发病90%以上为5岁以下儿童，托幼儿童和散居儿童大约各占一半；④实验室确诊的病例大多数是EV71型，危重患儿病例增加。这为及早、迅速和准确地检测确定手足口病原体传染性疾病的治疗与预防提出了更高的要求。本文采用实时荧光PCR技术，对桂林市妇女儿童医院确诊的手足口病患儿进行肠道病原学进行鉴别与分析。现将实验报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

样本来源于桂林市妇女儿童医院，2010年临床确诊为手足口病的患儿，共40例，诊断依据卫生部发布的《手足口病预防控制指南》（2008 版）[3]。 年龄 0.75～10.00 岁，平均 3.15 岁。均使用肛拭子法采集患儿粪便标本，共计40份样本，样本均按照《手足口病预防控制指南》的要求进行采集储存及转运操作。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 样本采集使用肛拭子法，用无菌棉签采集患儿的粪便，放于病毒汉格氏液保存管，冷藏运至实验室，-20℃保存，取上清200 μl用于提取病毒RNA[4]。

1.2.2主要试剂及仪器 本实验室用荧光PCR仪器为美国ABI公司生产，型号为7500。所用分光光度计为美国Varian生产的Cary50Probe紫外光度计。所用超速离心机为德国Eppendorf生产。试剂盒包括提取RNA的试剂盒等均购于北京金豪生物有限公司。……