蒙药巴特尔-7体外对胃癌细胞生长的影响
2011-08-13邓秀玲刘淑萍王栋
邓秀玲 刘淑萍 王栋
恶性肿瘤严重威胁着人们的生命,它的发生、发展与细胞异常增殖和分化有关,如何抑制肿瘤细胞的无限增殖能力,是肿瘤治疗的一个基本问题。本实验探讨蒙药巴特尔-7对胃癌细胞生长的影响,为抗肿瘤蒙药的进一步开发提供一些理论依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料 培养基DMEM为Gibco公司产品,胎牛血清为中国医学科学院血液学研究所生产,噻唑蓝(MTT)和二甲基亚砜(DMSO)均为Sigama公司产品。蒙成药巴特尔-7(以下简称蒙药)、由内蒙古中蒙医院制剂室生产,用PBS配成50 mg/ml贮液,0.2 mm滤膜过滤除菌4℃保存,实验时用培养液稀释到所需浓度。
1.2 细胞培养 MGC-803细胞由北京肿瘤研究所提供,于含庆大霉素80U/ml、10%灭活胎牛血清的DMEM的培养液中培养,置37℃、5%CO2温箱中孵育,取对数生长期细胞用于实验。
1.3 蒙药对胃癌MGC-803的细胞杀伤作用:采用噻唑蓝比色法(MTT法),取对数生长期的MGC-803细胞,经消化液消化后制成单细胞悬液,调整细胞浓度为3×104个/ml接种96孔培养板,吹打均匀,每孔接种细胞悬液100 μl,置37℃、5%CO2温箱中孵育。24 h后实验组分别加入不同浓度的蒙药,终浓度分别为 2.5、1.25、0.63、0.31、0.15 mg/ml。另设阴性对照组(只有细胞,不加药),空白对照组(只含等量培养基,无细胞和药)。各处理组设8个复孔。以上各处理组总体积均为200 ul。加药后继续培养72 h,每孔加入20 ulMTT(5mg/ml)37℃温育4 h,离心弃上清后每孔加200 ulDMSO,振荡10 min。选择570 nm波长,酶标仪上检测各复孔吸光度(A值)。进行数据统计时,每组去除一个最大值和最小值,按下列公式计算细胞生长抑制率。
抑制率%=(对照组平均A值-实验组平……
