魏二虹 张文举 刘东军 于 磊 石国庆

棉籽饼粕富含蛋白质，是很好的动物饲料蛋白资源。但因其含有对动物有毒的游离棉酚，使其利用价值受到极大限制。为此，国内外有关研究人员对棉籽饼粕的脱毒方法及途径进行了广泛而深入的研究，取得了许多研究成果，如物理法、化学法[1-5]以及微生物发酵法等。微生物发酵法是20世纪80年代后期在中国首先发展起来的一种棉籽饼粕脱毒途径。该方法是将特定微生物接种到棉籽饼粕培养基中，在一定的条件下，利用微生物在饲料原料中的生长繁殖和新陈代谢，棉酚被分解利用或与蛋白质氨基酸结合形成结合棉酚，从而达到脱毒的目的[6-12]。前人对微生物固体发酵棉籽饼粕脱毒的研究主要集中在脱毒菌种的优化筛选[6-7,12-15]、发酵底物组成及发酵参数的优化[8-11]、发酵前后棉籽饼粕养分含量及消化利用率的变化[16-19]等方面，但对棉籽饼粕微生物固态发酵脱毒的详细机理的研究却很少[20]。本研究主要利用浙江大学选育的对棉酚具有较强降解力的热带假丝酵母菌ZD-3(Candida tropicalis)、酿酒酵母菌ZD-5(Saccharomyces cerevisiae)和黑曲霉ZD-8(Aspergillus niger)对棉籽饼进行复合菌种发酵，然后通过测定发酵底物中总棉酚（Total Gossypol，TG)、游离棉酚(Free Gossypol，FG)、结合棉酚(Bound Gossypol，BG)含量的变化，来研究复合发酵对棉籽饼混合底物中棉酚含量的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验底物

棉籽饼由新疆石河子产，粉碎，过60目筛。经测定可知样品中TG含量7 062.7mg/kg，FG含量921.7mg/kg、BG含量6 141.0mg/kg，粗蛋白含量39.20%。

棉籽饼混合底物：将上述棉籽饼与玉米粉、麦麸按7：2：1的比例混合均匀成基础底物，复合发酵时再按基础底物与蒸馏水1：0.9的比例加入蒸馏水，在0.056 MPa条件下，112.6℃蒸汽灭菌20 min。……